第16章分子育种.pptVIP

第16章 分子育种;;;;一、进展;二、基因工程;1.目的基因的选取;2.外源基因导入植物的方法;;染色体介导的直接转化;直接转移系统法;;需要具备如下条件： 高效的植株再生体系。选择容易从体细胞再生植株的受体基因型是获得转化成功的关键。 受体植物细胞对农杆菌要有很高的亲和力。一般认为受体细胞应处于高度的分裂状态，T-DNA才能插入植物基因组； 具有有效的选择系统。必须有一个理想的选择方法将转化细胞从非转化细胞中选择出来； 稳定的转化技术和基因表达。外源基因转入植物后应能传???并稳定表达。 ;一般技术程序 农杆菌侵染植物细胞、细菌与植物细胞共培养、在筛选培养基上筛选、获得转化细胞克隆、转化细胞分化并再生植株。 叶圆盘转化法。带有伤口的植物叶片的圆盘。使用的外植体可以是叶圆盘、下胚轴、胚性愈伤组织等。;;选择是为了将转化细胞与非转化细胞区分开，使转化细胞具有生长优势。在构建载体时，往往在目的基因上连上一个选择标记基因。 通常使用的是抗生素抗性基因，如NPTII基因——新霉素磷酸转移酶基因，能分解卡那霉素等抗生素。 其它选择标记基因，如抗除草剂基因，报告基因（如：GUS基因）等。;质粒图谱及质粒构建 启动子 外源基因 终止子 启动子 报告基因 终止子