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第八章 人工种子 人工种子（artificial seeds),又称合成种子（synthetic seeds)或体细胞种子（somatic seeds) 1978年，Murashige在第四届国际植物组织细胞培养大会上提出。 第一节 人工种子概念 狭义 的概念是指植物离体培养中产生的胚状体（包括体细胞胚和性细胞胚），包裹在含有养分和具有保护功能的物质中，并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。 广义 而言，人工种子是在胚状体或一块组织（顶芽、腋芽）、一个器官（小鳞茎等）之外加上必要的营养成分（人工胚乳）后，用具有一定通透性而无毒的材料将其包裹起来，形成的与天然种子相似的颗粒体 人工种子的结构 农业生产中使用的天然种子，一般都是由种被、胚乳和胚三部分构成。 目前研制的人工种子的结构: 体细胞胚、人工种皮、人工胚乳 人工种子制作要求（狭义） 人工种子制作要求：要求能够同步地、大规模地产生成熟的体细胞胚状体；给胚状体包裹上高质量的人工种皮；最后解决人工种子的保存和运输问题。 控制胚状体的同步发育 控制胚状体同步发育的方法： 1、用 DNA抑制剂处理细胞培养物 5-氨基尿嘧啶；低温处理抑制细胞分裂，再把温度提高到正常的培养温度，也可达到部分同步化。 2、分离过筛 可获得大小均一的胚性细胞团，再转移到无激素培养基上培养，可得到大小基本一致的胚状体。 3、利用气体调控胚状体的同步发生 间歇性地向悬浮培养物中通氮气或乙烯可达到胚状体发生的同步化。 4、利用渗透压调控胚状体的同步生长 胚状体由小到大，其渗透压由高到低。可用高浓度的蔗糖培养基来控制胚的发育，使其停留于某一阶段，然后降低蔗糖浓度，使胚状体进入同步发育的状态。 胚状体的包埋与人工种子的制作 人工种皮要满足的要求：①包埋剂应当对胚状体无害，成本低廉；②要有一定硬度，能保护胚状体不受损害；③应当含有生长激素和防腐剂，有利于胚状体的萌发。 好的包埋剂：既能包住体细胞胚，又能保证胚的存活和正常萌发 褐藻酸盐、琼脂、白明胶、角叉菜胶和槐豆胶 最好是褐藻酸盐 包埋过程 胚状体和2％藻酸钠混合，吸管吸入，滴到2.5%氯化钙水溶液中，两种离子交换，在胚状体外面产生褐藻酸钙的胶囊，形成人工种皮。 胶囊大小，人工种皮厚度都可以控制。 人工胚乳：营养物质、植物激素和抗菌物质。 人工种皮 胶囊之外的包膜称之为人工种皮，有防止机械损伤及水分干燥等保护作用。包裹成功的人工种子既能通气、保持水分和营养，又能防止外部一定的机械冲击力。 人工胚乳 人工胚乳一般由含有供应胚状体养分的胶囊组成,养分包括矿质元素、维生素、碳源以及激素等。 第二节 繁殖体的类型及生产 根据Redenbaugh对人工种子的分类方法，可将人工种子分为三大类： 裸露的或休眠的繁殖体 如微鳞茎，微块茎等。它们在不加包被的情况下也具有较高的成株率。 人工种皮包被的繁殖体 一些体细胞胚、原球茎等不能过度干燥，但只需要用人工种皮包被即可维持良好的发芽状态，如胡萝卜体细胞胚。 水凝胶包埋再包被人工种皮的繁殖体 大多数体细胞胚、不定芽、茎尖等均需要先包埋在半液态凝胶中，再经人工种皮包裹才能避免失水，从而维持良好的发芽能力。 生产人工种子的意义 其一，在无性繁殖植物中，有可能建立一种高效快速的繁殖方法，它既 能保持原有品种的种性，又可以使之具有实生苗的复壮效应； 其二，可以对优异杂种种子不通过有性制种而快速获得大量种子，特别是对于那些制种困难的植物更具有主要的适用意义； 其三，对于一些不能正常产生种子的特殊植物材料如三倍体、非整倍体、工程植物等，有可能通过人工种子在短期内加大繁殖应用；其四，与田间制种相比，可以节省制种用地，且不受季节限制，可以实现工厂化生产，同时还避免了种子携带病原菌的危险；其五，与利用试管苗相比，可以避免移栽困难，且可以实现机械化操作，同时还便于储藏和运输。  人工种子的局限性 目前，绝大多数人工种子发芽需要无菌条件，所以，还不能实现广泛应用。另外，人工种子的制作费用过高，并且在应用上需要各个环节的配套，这些都限制了人工种子的推广。 表7.1 以体细胞胚为繁殖体的人工种子  表7.2 以器官为繁殖体的人工种子  人工种子的基本制作流程（体细胞胚） 1、外植体的选择和消毒 2、愈伤组织的诱导 3、体细胞胚的诱导 4、体细胞胚的同步化 5、体细胞胚的分选 6、体细胞胚的包裹(人工胚乳) 7、包裹外膜 8、发芽成苗试验 9、体细胞胚变异程度与农艺研究 人工种子繁殖体的处理 体细胞胚