人卵巢癌微血管内皮细胞的分离培养与鉴定-第三军医大学学报.docVIP

PAGE PAGE 1 人卵巢癌微血管内皮细胞的培养与鉴定 徐 燕 梁志清 王 丹 （第三军医大学西南医院妇产科，重庆 400038) 【摘要】 目的 建立人卵巢癌微血管内皮细胞(ovarian carcinoma-derived microvascular endothelial cells ,ODMEC)体外培养体系。方法 采用胰酶、胶原酶、dNaseⅠ酶联合消化法分离微血管内皮,再利用结合有CD31抗体的MACS MicroBeads 免疫磁珠分选系统纯化ODMEC。通过光镜、流式细胞术、免疫细胞化学和检测其结合UEA和摄取乙酰化低密度脂蛋白的能力，对所获得的ODMEC进行鉴定。结果 所获ODMEC流式CD31分析细胞纯度可达99.6%，表达CD34、CD31、FⅧ-Rag，可结合UEA并能摄取乙酰化低密度脂蛋白。培养中的内皮细胞生长状态良好，呈现典型的铺路石征，有接触抑制，可传代培养。培养过程中观测到ODMEC在无明胶包被的培养池内，于第5周-6周可自发性地形成管腔样结构。 结论 本研究成功建立了人ODMEC的免疫磁珠分选系统，并初步观察了其生物学特性，为抗卵巢癌微血管生成的研究奠定了实验基础。 【关键词】 微血管内皮细胞；卵巢癌；细胞培养；免疫磁珠 Culture and identification of microvascular endoth