饲料中维生素A、维生素D3、维生素E的同步快速测定　高效液相色谱法.doc

ICS FORMTEXT 65.120 FORMTEXT B 46 FORMTEXT DB FORMTEXT 37 FORMTEXT 山东省地方标准 DB FORMTEXT 37/T FORMTEXT XXXXX— FORMTEXT XXXX FORMTEXT FORMTEXT 饲料中维生素A、维生素D3、维生素E的同步快速测定　高效液相色谱法 FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX发布 FORMTEXT - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX实施 FORMTEXT 山东省市场监督管理局发布 目次 TOC \h \z \t"前言、引言标题,1,参考文献、索引标题,1,章标题,1,参考文献,1,附录标识,1,一级条标题, 3" 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 原理 1 4 试剂或材料 1 5 仪器设备 2 6 样品 2 7 试验步骤 2 7.1 提取 2 7.2 浓缩 2 7.3 液相色谱参考条件 3 7.4 标准系列溶液 3 7.5 测定 3 8 试验数据处理 3 8.1 维生素A乙酸酯含量 3 8.2 维生素D3含量 4 8.3 维生素E乙酸酯含量 5 9 精密度 5 附　录　A （规范性附录） 维生素A乙酸酯、维生素D3、维生素E乙酸酯标准溶液浓度校正方法 6 附　录　B （资料性附录） 维生素A乙酸酯、维生素D3和维生素E乙酸酯标准溶液的高效液相色谱图 7 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由山东省畜牧兽医局提出并监督实施。 本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省饲料质量检验所、青岛市华测检测技术有限公司。 本标准主要起草人：强莉、吕明春、刘雪芹、李斌、宫玲玲、李俊玲。 饲料中维生素A、维生素D3、维生素E的同步快速测定高效液相色谱法 范围 本标准规定了饲料中维生素A乙酸酯、维生素D3、维生素E乙酸酯测定的高效液相色谱方法。 本标准适用于复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素A乙酸酯、维生素D3、维生素E乙酸酯的测定。其他饲料可参照执行。 本方法定量限：维生素A乙酸酯为10 000 IU/kg；维生素D3为40 000 IU/kg；维生素E乙酸酯为100 mg/kg。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1　饲料采样 GB/T 20195　动物饲料　试样的制备 原理 试样中的维生素A乙酸酯、维生素D3和维生素E乙酸酯用二甲基亚砜(DMSO)超声溶解，经正己烷萃取、浓缩、复溶后，供高效液相色谱仪测定，外标法定量。 试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 水：GB/T 6682，一级。 正己烷。 二甲基亚砜（DMSO）：色谱纯。 甲醇：色谱纯。 维生素A乙酸酯标准储备溶液（1 mg/mL）：称取维生素A乙酸酯标准品（CAS：127-47-9，纯度不低于99.0 %）50 mg(准确至0.01 mg)于50 mL棕色容量瓶中，用甲醇(4.4)溶解定容。置-18 ℃冰箱保存，有效期为3个月。临用前利用紫外分光光度计检测其吸光度值，计算其准确浓度。（校正方法见附录A）。 维生素D3标准储备溶液（1 mg/mL）：称取维生素D3标准品（CAS：67-97-0，纯度不低于99.0 %）50 mg(准确至0.01 mg)于50 mL棕色容量瓶中，用甲醇(4.4)溶解定容。置-18 ℃冰箱避光保存。有效期为3个月。临用前利用紫外分光光度计检测其吸光度值，计算其准确浓度。（校正方法见附录A）。 维生素E标准工作溶液（1 mg/mL）：称取DL-а-生育酚乙酸酯标准品（CAS：7695-91-2，纯度不低于99.0 %）50 mg(准确至0.01 mg)于50 mL棕色容量瓶中，用甲醇(4.4)溶解定容。置-18 ℃冰箱避光保存。有效期为3个月。临用前利用紫外分光光度计检测其吸光度值，计算其准确浓度。（校正方法见附录A）。 维生素A标准工作液：准确吸取1.00 mL的维生素A标准储备液（4.5）于10 mL棕色容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。维生素A标准工作液浓度为100 μg/mL。于-18 ℃保存，有效期为半个月。 维生素D3标准工作液：准确吸取0.50 mL维生素D3标准储备液（4.6）于10