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基因工程工具酶 生物与食品工程学院 1. 脱氧核糖核酸酶（DNase） 特征：非特异性随机水解双链或单链DNA 的内切核酸酶。 需要二价阳离子作为辅助因子 作用方式与辅助因子相关 2. 外切核酸酶 是一类能从DNA或RNA链的一端开始按顺序催化磷酸二酯键，产生单核苷酸的核酸酶。 5’→ 3’ 3’→ 5’ 两端切割 3. 限制性内切核酸酶 专一性地识别双链DNA上的特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开。 生理功能：保护 基因工程功能：剪刀 3. 限制性内切核酸酶 甲基化酶：使核苷酸的碱基甲基化。 甲基化酶同限制性内切核酸酶有相同的识别序列 可以用限制性内切核酸酶的名称来命名甲基化酶 3. 限制性内切核酸酶的命名 生物属名的第一个字母 生物种名的第一、二个字母 菌株代号中的一个字母 先后次序 罗马数字 3. 限制性内切核酸酶的识别序列 长度 6 二重互补对称 回文结构 可以通过电脑软件查找 3. 限制性内切核酸酶的识别序列 3. 限制性内切核酸酶切割特点 黏性末端 平末端 同尾酶 3. 限制性内切酶的一些特点 有些限制性内切核酸酶可以识别两种以上的核苷酸序列 同裂酶 不同的酶有相同的识别序列 Star活性 在特定的条件下，在不是识别序列处切割DNA 3. 限制性内切核酸酶的活性 底物纯度 分子构型 侧面序列 偏爱位点 侧面序列