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转基因大豆？ 专题一 基因工程 第1讲 DNA重组技术的基本工具 温故知新：核酸的类型 概念：细胞内携带遗传信息的物质，在生物体的遗传、 变异和蛋白质的生物合成中具有极其重要的作用。 脱氧核糖核酸(DNA) 核糖核酸(RNA) 基本单位： 脱氧核糖核苷酸 核糖核苷酸 碱基种类： A、G、C、T 基本单位： 碱基种类： A、G、C、U 类型 温故知新：核酸的空间结构 1. DNA分子是由两条反向平 行的脱氧核苷酸长链盘旋成 的双螺旋结构 2. DNA分子中的脱氧核糖和 磷酸交替连接,排列在外侧,构 成基本骨架;碱基排列在内侧 3. 两条链上的碱基通过氢键连接起来,形成碱基对,且遵循碱基互补配对原则。 温故知新：基因工程 概念：基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种 基因提取出来，加以修饰改造，然后转入到另一种生物 的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。也称为转基因技术。 原理：基因重组 优点： ①克服了远缘杂交不亲和的障碍； ②周期短；③目的性强 为什么能把一种生物的基因“嫁接”到另一种生物上并成功表达？ 1、大多数生物的遗传物质都是DNA，且主要为双螺 旋结构，即不同生物的DNA分子基本结构是相同的， 都遵循碱基互补配对原则 。所以不同的生物DNA可 以嫁接。 2、地球上的所有生物共用一套遗传密码，所以，一 种生物的基因可以在另外一种生物体内得以表达。 思考与讨论 基因工程的应用之一： 生产胰岛素 （复习糖尿病相关知识） 人的细胞 提取 胰岛素基因 与运载体DNA拼接 导入 上述生产胰岛素的关键步骤是什么？ 细菌(含胰岛素基因) 生产胰岛素 基因工程生产胰岛素简要过程： 胰岛素基因的获取 胰岛素基因导入受体细胞 胰岛素基因与运载体连接 基因工程生产胰岛素的关键步骤： 基因的“剪刀”——限制性内切酶 基因的“针线”——DNA连接酶 基因的运输工具——运载体 基因工程的操作工具 操作工具 大肠杆菌的一种ECORI限制酶识别GAATTC序列， 并在G和A之间切开）。 基因的“剪刀”──限制性核酸内切酶 基因工程的操作工具 基因工程的操作工具 基因的“剪刀”──限制性核酸内切酶 酶切位点：特定序列核苷酸的磷酸二酯键 酶切位点 酶切位点 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 黏性末端： 黏性末端 基因工程的操作工具 不同的限制性内切酶得到的黏性末端不同 中轴线 在G与C之间切割 SmaI只能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切开。 SmaI限制酶的作用 平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口是平整的，这样的切口叫平末端。 平末端　　　平末端 SmaI限制酶的作用 G A A T T C C T T A A G EcoRⅠ 中轴线 C C C G G G G G G C C C SmaⅠ 黏性末端　　　　 平末端　　　平末端 黏性末端 　　　　 仔细观察各限制酶识别的特定序列有何特点？ 限制酶的识别序列 限制酶所识别的序列的特点是：呈现碱基互补对称，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的 ，称为回文序列 限制酶的识别序列 同一种内切酶要切两个切口，产生四个黏性末端。 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就似乎可以合成重组的DNA分子了。 Q1：要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ Q2：如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 思考与讨论 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 基因的针线──DNA连接酶 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来(形成磷酸二酯键)，这样一个重组的DNA分子就形成了。 (连接“梯子”断口的“扶手”而非“梯子”中间的“踏板”) 基因工程的操作工具 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？ T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低 基因工程的操作工具 A A T T G C A