转化率的计算介绍.pptVIP

* * * * * * * * 精子进入卵细胞后，尾部消失，头部变圆膨大，形成雄原核；卵细胞完成第二次有丝分裂后，其细胞形成雌原核。雄原核与雌原核接触，各自的核股消失、融合，二性染色体在其后的台子分裂中混合、配对，受孕宣告结束，一个新生命宣告开始。受精过程约需24小时。 * * * * * * * * * 操作简便，成本低廉、可大批量转染、对细胞毒性小、效果稳定，但转染效率低。 2. 脂质体介导法 脂质体包埋DNA，通过细胞膜进入细胞。 脂质体（lipofectin）载体法 应用玻璃显微注射器，直接把外源DNA注射到宿主细胞核里，使其整合到染色体上。 3. 显微注射法 1）外源基因制备：线性化的质粒或目的片段 2）收集受精卵：受孕后几小时内 3）显微注射：将外源基因注入受精卵的雄原核 4）受精卵移植 显微注射法(microinjection) 二乙氨乙基（DEAE）葡聚糖为多聚阳离子试剂，能促进哺乳动物细胞摄入外源DNA。 4. DEAE-葡萄糖转染法 葡聚糖 葡聚糖 DEAE-dextran 外源DNA 细胞 混合 DEAE-dextran对细胞有毒，常采用低浓度长时间处理 吸附到细胞表面后被细胞吞入，部分DNA可以进入到细胞核里。 4. DEAE-葡萄糖转染法 导入外源DNA的几种方法 三、转化率及影响因素 转化率（cfu / μgDNA）：每微克重组DNA转化后，