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(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合: 将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入活化酵母细胞液,搅拌后吸入到注射器中。 〖思考4〗为什么要海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞? 防止高温杀死酵母细胞。 (5)固定化酵母细胞: 以恒定速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中,形成凝胶珠状颗粒。 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。 检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法: 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。 这一阶段成功与否呢?怎样评价? 观察凝胶珠的颜色和形状: 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。 (6)冲洗:将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2~3次。 (二).固定化酵母细胞的发酵 (二).固定化酵母细胞的发酵 (6)冲洗:将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2~3次。 (7)发酵:150mL10%葡萄糖+固定化酵母细胞→200mL锥形瓶→密封→25℃发酵24h。 〖思考5〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封? 〖思考6〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的? 〖思考7〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中,需要无菌操作吗? 〖思考5〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封? 〖思考6〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的? 〖思考7〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中,需要无菌操作吗? 酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。 〖思考5〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封? 〖思考6〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的? 〖思考7〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中,需要无菌操作吗? 酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。 酵母菌进行无氧呼吸产生的。 〖思考5〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封? 〖思考6〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的? 〖思考7〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中,需要无菌操作吗? 酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。 酵母菌进行无氧呼吸产生的。 需要。 这一阶段成功与否呢?怎样评价? 观察发酵的葡萄糖溶液; 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多气泡,同时会闻到酒味。 还有其他方法吗? 课堂小结: 基础知识 固定化酶的应用技术 固定化细胞技术 实验操作 制备固定化酵母细胞 用固定化酵母细胞发酵 练习: 1、下列说法不正确的是( ) A、葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成的是果糖 B、从固定化酶反应柱下端流出的是果糖 C、高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病 D、酶溶解于葡萄糖溶液,可以从糖浆中回收 D 2、如果反应物是大分子物质,采用那种方法催化受限制( )。 A.直接使用酶 B.使用化学方法结合的酶 C.使用固定化细胞 D.使用物理吸附法固定的酶 C 3、下列关于酶和细胞的固定叙述不正确的是( )。 A.酶分子很小,易采用包埋法 B.酶分子很小,易采用化学结合或物理吸附法固定的酶 C.细胞个大,难被吸附或结合 D.细胞易采用包埋法固定 A 4. 关于固定化酶的叙述不正确的是 ( )。 A.既能与反应物接触,又能与反应 物分离 B.固定在载体上的酶可被反复利用 C.可催化一系列反应 D.酶的活性和稳定性受到限制 C 5、固定化细胞对酶的活性影响最小,根本原因是( )。 A.避免了细胞破碎、酶的提取纯化过程 B.固定化细胞在多种酶促反应中连续发挥作用 C.促化反应结束后,能被吸收和重复利用 D.细胞结构保证了各种酶在细胞内化学反应中有效的发挥作用 D * 课题3 酵母细胞的固定化 温故知新: 1、洗衣粉中添加________可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_________________ 四类。 2、影响酶活性的因素有_______、 ________和_________。 酶制剂 蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶 温度 酸碱度 表面活性剂 酶制剂的优点: 催化效率高、低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域。 酶制剂存在的缺陷: 1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活 2、溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本; 3、反应后会混在产物中,可能影响产品质量。 如果
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