肺部感染性疾病支气管肺泡灌洗病原体检测中国专家共识2017年.ppt

备注： BCYE营养培养基：活性炭酵母浸出物营养培养基； GVPC军团菌筛选培养基：甘氨酸-万古霉素-多黏菌素-放线菌酮军团菌筛选； MWY军团菌筛选培养基：甘氨酸-万古霉素-多黏菌素B军团菌筛选培养基； DFA：直接免疫荧光试验； KOH：氢氧化钾； GM：半乳甘露聚糖； ELISA：酶联免疫吸附试验； ICT：免疫层析法 标本送检 临床意义 * * 微生物学涂片检查：BALF中的沉淀物进行革兰染色、抗酸染色及真菌的特殊染色，对细菌、分枝杆菌、真菌及寄生虫的检出有较大意义。 微生物学培养：在严格无菌操作下采集的BALF进行直接接种培养或取其沉淀物进行培养，对检测细菌及真菌具有较大的临床意义，BALF细菌培养计数≥104CFU/ml或无菌防污染BALF≥103CFU/ml时具有临床诊断意义。 灌洗液中GM测定：取5~10ml灌洗液置于无菌容器中，4 h内送检；对于早期快速诊断侵袭性肺曲霉病，特别是气道曲霉感染的患者具有重要的临床价值。 对于某些特殊病原体，如病毒、肺孢子菌及寄生虫等可通过BALF中的抗原或核酸测定进行诊断。 临床意义 * * 细胞学分类：本共识主要用于规范利用BALF标本进行下呼吸道病原学检测，在回吸收的肺泡灌洗量足够的情况下，也可进一步行细胞学分析。灌洗液中以中性粒细胞比例增高为主时，见于各种细菌或真菌等感染；以淋巴细胞比例增高为主时，见于病毒性肺炎、结节病或过敏性肺炎，还可根据BALF中淋巴细胞的亚群，区分不同间质性肺疾病；以嗜酸粒细胞比例增高为主时，见于嗜酸粒细胞浸润症、支气管哮喘或变应性支气管肺曲霉病等。 常见问题说明 灌洗部位的选择： 可参考近期的胸部CT，遵循“灌洗病变叶段”的原则，特别是出现新的或进展性的浸润性病变的叶段；影像学提示双肺弥漫性病变时，推荐选择右肺中叶或左肺舌段，这2个部位的灌洗操作便利且回吸收量较多（与下叶比较可增加约20%）。对于肺外周病变，有条件的单位可考虑采用径向超声支气管镜技术进行更准确的定位。 常见问题说明 * * 灌洗液量的选择： 灌洗量的多少可影响标本检测的结果，包括细胞比例、蛋白含量及GM水平等。具体灌洗多少生理盐水是合适的，不同文献甚至指南的推荐均有差异。Rennard等发现，灌入20ml液体后获得的回吸收标本内含有更多的上皮细胞和铁蛋白，表明该标本更可能是支气管灌洗液。研究结果表明，在灌入60 ml或120 ml液体时所回吸收标本的检测结果差异明显，至少灌入120 ml生理盐水时所回吸收的标本结果才相对稳定。上述文献主要集中于健康成人及间质性肺疾病患者的观察，对于肺部感染性疾病患者，基于查找病原体的目的，又要防止在灌洗过程中感染的扩散，本共识认为采用60~120 ml的灌洗剂量，且分次灌洗，是比较好的方法。 常见问题说明 * * 吸引负压的选择： 过大的负压会引起支气管壁塌陷或黏膜损伤，从而影响灌洗液的回收量和质量。但负压过小时，回吸收量亦会受到影响。美国胸科协会发布的指南中推荐采用100 mmHg的负压。在临床实际工作中，可以参考但不局限于这一数值，选择合适的负压（如100～-150 mmHg），尽可能多的收集标本。 BALF的预处理： 对获取的BALF，特别是含有黏液成分时，是否需要无菌纱布过滤？本共识认为不需要常规过滤，因为在过滤过程中，细胞会黏附于纱布，会损失部分细胞及其他成分，如肺孢子菌（Pneumocystis jirovecii）更多的存在于黏液成分。过滤过程会使标本的稳定性受到影响，且存在污染的可能性。 常见问题说明 * * 第1管回吸收液的处理： 研究结果显示，第1管回吸收液与后续回吸收的标本中细胞成分有较大差异，有学者建议第1管回吸收的灌洗液需单独处理或舍弃。美国胸科协会推荐混合所有的灌洗液包括第1管的灌洗液进行常规的细胞学分析。本共识认为，如果考虑气道的疾病，第1管的回吸收标本需单独处理。而对于大多数疾病，可考虑混合所有的标本进行检测。 常见问题说明 BALF的储存与转运： BALF的储存对于GM的检测结果非常重要。获取BALF标本后，应尽快送至实验室完成检测。BALF的GM水平在4℃条件下24 h内保持稳定。血清和BALF的GM水平在零下20℃条件下可以存放11个月保持相对稳定。如果标本在采集后立即送到实验室检测，可在室温下转送，要求送检时间?4 h。如果送检时间超过4 h，应在4℃下保存，可以储存24 h；超过24 h的标本，不适合再送检。 * * 常见问题说明 * * BALF-GM的解读： 作为非培养检测手段诊断侵袭性肺曲霉病，BALF-GM已被列入IDSA和EORTC/MSG推荐的诊断标准之一。但在临床诊治工作中，不能仅凭BALF-GM的结果进行抗真菌治疗，需要结合临床资