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第二章组成细胞的分子 网络构建 * 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 1.实验原理 斐林试剂 苏丹Ⅲ 橘黄色 红色 砖红色沉淀 紫色 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂 鉴定物质 试剂 实验现象 还原性糖 脂肪 蛋白质 淀粉 碘 蓝色 必修1第18~19页 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 实验原理 溶液呈紫色 双缩脲试剂NaOH和CuSO4 蛋白质的鉴定 砖红色沉淀 斐林试剂NaOH和CuSO4 可溶还原糖的鉴定 结果 加热与否 方法 溶液浓度 原理 试剂及成分 比较项目 斐林试剂与双缩脲试剂的配制及使用 新配制的 Cu(OH)2 溶液 在碱性 环境下 的Cu2+ NaOH 浓度为 0.1g/mL CuS04 浓度为0.05g/mL NaOH 浓度为 0.1g/mL CuS04 浓度为0.01g/mL 先把NaOH 溶液和CuSO4 溶液等量混 合, 现用现配。 先加入Na0H 1mL,然后 再加CuS04 4滴,摇匀。 (不能过量) 水浴 加热 不 需 要 方法步骤: 1.实验材料、仪器和试剂的选择 2.设计记录表格,记录预测结果 3.检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察; 实验的材料的选择和处理有什么要求? 材料的选择 材料的处理 还原性糖的鉴定 脂肪的鉴定 含糖高,颜色为 白色的植物组织, 如苹果和梨 富含脂肪的种子 ,如花生 浸泡3~4小时 / 蛋白质的鉴定 富含蛋白质的 黄豆或鸡蛋清 黄豆需浸泡1-2天,鸡蛋清要先稀释 淀粉的鉴定 马铃薯 / 选材:含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对 显色的干扰),苹果、梨最好 。 实验流程(步骤) 1.可溶性还原糖 制备组织样液: 制浆:去皮、切块、研磨, 过滤:(用单层纱布) 取液:(2mL) 显色反应 现象: (用前混匀) 50~65.C水浴 加热2min 还原糖的检测和观察: 还原糖的检测结果 2.脂肪的鉴定 取材:花生种子(浸泡3-4h),去皮,将子叶削成薄片 制片: ①选取最薄的薄片移至载玻片中央 ②在薄片上滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 染液2 - 3滴,染色 2-3min ③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴,洗去浮色 (多余的苏丹Ⅲ ) ④吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片 显微观察: 先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察 现象: 有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒 脂肪微粒 脂肪的检测结果 3.蛋白质的鉴定 选材与制备 组织样液: 黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液) [黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液] 显色反应 现象: 无色 紫色或紫红色 (创设碱性条件) (提供Cu2+) 蛋白质的检测结果 4.淀粉的鉴定 取材:马铃薯匀浆 检测: 碘液2滴 现象: 摇匀后变成蓝色 小麦种子 花生种子 黄豆 胡萝卜 黄桃 梨 各种可供实验的材料 ①其中适合于鉴定可溶性还原糖的是 ,理由是梨的组织细胞 ,你打算用什么试剂鉴定? 。 ②小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪,这是因为 ,你打算用什么试剂鉴定? . [例] 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时,需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题: 梨 颜色为白色,并且糖含量较高 斐林试剂 脂肪含量不如花生高,也不容易做切片 用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ试剂 ③小麦种子中糖类化合物 含量很高,却不适合用 来鉴定 __________,这是因为 ________________________________________。 ④适合于鉴定蛋白质的是 ,理由是 ,鉴定所用的试剂是
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