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微生物细胞数目的测定技术 一、显微镜直接计数法 定义 将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片（计菌器）上，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。 常用计菌器 常用计数器有血细胞计数板(血球计数板)、Petroff-Hauser计菌器以及Hawksley计菌器等。 血细胞计数板：较厚，不能使用油镜观察，只能计数较大的霉菌孢子和酵母菌； 而后两种计菌器细菌，可以使用油镜观察，因此可以直接计数细菌。 最常用：血细胞计数板技术法。 直接计数法优缺点 优点：直观、快速、操作简单。 缺点： 不能区分死菌与活菌，所得为总数； 不适于对运动细菌的计数。 血球计数板是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台；中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各列有一个方格网。 每个方格网共分为九个大方格，中间的大方格即为计数室。 计数室的刻度一般有两种规格：一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格。 另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格； 计数方法 计算： 1mL菌液中总菌数=A/5*25*104*B=50000*A*B 1mL菌液中总菌数=A/5*16*104*B=32000*A*B 其中B为稀释倍数。 注意事项 对于出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。 对于压线酵母，