实验四 酵母细胞的固定化;一、 实验目的和要求;二、 实验原理;
固定化细胞材料
2.5%海藻酸钠溶液20mL,加热助溶,冷至45℃备用。
配制50mL 1.5%CaCl2。
● 20毫升注射器,150ml烧杯和50ml烧杯各一个、三角瓶、玻璃棒、温度计、镊子;
酵母细胞的活化
取市售干酵母按1g投入到20ml 36~38℃的温水中活化15~20分钟,酵母细胞活化时体积会变大,活化前应该选择体积足够大的容器,以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。;
酵母细胞的固定化
在冷却至45~50℃左右海藻酸钠溶液中,加入5mL预热至35℃的酵母培养液,混合均匀。将混合液装入注射器中,装上大好针头,以缓慢而稳定的速度将其滴入1.5%CaCl2溶液中,边滴边摇动三角瓶,即可制得直径为3mm左右的凝胶珠。
在CaCl2溶液中钙化30min,即可使用。;
加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环
一定要溶解彻底,在溶解过程中不断搅拌,在降温过程中不能低于45 ℃,否则会凝固。;
海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量
如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;
如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。;
刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形
成稳定的结构
检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法。
一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌
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