二氯化钴在体外细胞缺氧研究中的应用.docVIP

国际口腔医学杂志第36卷第4期2009年7月InternationalJournalofStomatologyVol.36No.4Jul.2009收稿日期2008-11-20修回日期2009-03-23作者简介权晶晶1983男安徽人硕士通讯作者凌均棨Tel020氯化钴是一种化学制剂在体外诱导细胞缺氧研究中常用结晶水形态六水合氯化钴。本文将就二氯化钴体外模拟细胞低氧环境的机制及二氯化钴在细胞增殖、分化及应激反应研究中的应用作一综述。1二氯化钴体外诱导细胞缺氧的机制二氯化钴应用于体外模拟细胞低氧环境这与二价钴离子可诱导细胞中低氧诱导因子hypoxiainducedfactorHIF及其调控基因的表达有关。转录因子HIF由α和β两个亚基组成其中α亚基是功能性亚基包括3种同分异构体HIF-1α、HIF-2α、HIF-3α通常有氧条件下在胞质内处于失活状态β亚基是结构性亚基因非依赖性氧降解在胞核内稳定表达1。HIF-α蛋白有近200氨基酸序列被称作氧依赖性降解区域oxygendepen-dentdegradationdomainODD常氧下ODD中一些脯氨酸残基被脯氨酸羟化酶prolylhydroxy-lasesPHD羟化随后经抑癌基因vonHippel-Lindau产物vonHippel-LindauproteinpVHL特异性识别并通过泛素化途径降解2。由于二价钴离子可通过置换PHD辅助因子二价铁离子阻止HIF-α被羟基化同时能影响pVHL结合HIF-αODD因此二氯化钴可稳定细胞内HIF-α的表达3。低氧累积的HIF-α与胞核中一直持续表达的HIF-β形成异源二聚体HIF识别并结合调控基因中的低氧反应元件hypoxiaresponseelementHRE激活靶基因的转录。HRE目前已知存在于高达100余种基因的DNA序列中涉及能量代谢、红细胞生成、血管收缩与发生、细胞增殖与分化、铁与血红素的代谢以及一些细胞因子和NO的合成等多方面4-5。2二氯化钴在细胞增殖、分化及应激反应研究中的应用2.1应用于体外神经细胞相关研究Nowak等6用含浓度为100μmol/L的二氯化钴无血清培养基体外诱导新生鼠神经元及神经胶质细胞缺氧24h后发现垂体腺苷酸环化酶促多肽pituitaryadenylatecyclase-activatingpolypeptidPACAP及血管活性肠肽vasoactiveintestinalpep-tideVIP激活的腺苷酸环化酶受体激活的环磷酸腺苷cyclicadenosinemonophosphatecAMP表达量与正常氧组细胞相比明显下降。实验提示低氧可通过干扰受体蛋白或其耦联水平来影响PACAP和VIP的表达减弱对神经系统保护的作用。二氯化钴在体外细胞缺氧研究中的应用摘要二氯化钴常用于体外诱导细胞缺氧在细胞增殖、分化及应激反应研究中得到广泛应用。牙髓炎症状态时存在低氧环境有关二氯化钴的应用研究为体外诱导牙髓细胞缺氧提供了可借鉴的思路和方法。关键词二氯化钴细胞低氧低氧诱导因子中图分类号R318.08文献标识码AApplicationofcobaltchlorideincellhypoxiainvitroresearchQUANJing-jingLIGun-qi.ResearchInstituteofStomatologyGuanghuaSchoolofStomatologySunYat-SenUniversityuangzhou510080ChinaAbstractCobaltchlorideahypoxia-mimickingagentiswidelyusedintheresearchofcellproliferationdif-ferentiationandvarioushypoxicresponses.Thepulpalinflammationcouldresultinhypoxiaandsubsequentpulpdamageandthesestudiesoncobaltchloridemayprovidenewmethodstoinducedentalpulpcellshypoxiainvitro.Keywordscobaltchloridehypoxiahypoxiainducedfactor权晶晶综述凌均审校中山大学光华口腔医学院口腔医学研究所广东广州510080棨455--国际口腔医学杂志第36卷第4期2009年7月InternationalJournalofStomatologyVol.36No.4Jul.2009Wang等7用150nmol/L二氯化钴培养液处理N9鼠类小神经胶质细胞株16h后电泳迁移率变动分析electrophoreticmobilityshiftassa