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中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告
2015年11月17号
姓名:白洁 专业年级: 2014级生物科学 学号: 14050011001同组者:高远 高学雨
课程: 植物生理学实验 题目:呼吸酶的简易测定法
一、实验目的
学习植物呼吸作用的另一种测定方法,掌握用小篮子法测定植物的呼吸作用速率.
二、实验原理
植物进行呼吸时放出CO2 ,测定一定的植物材料在单位时间内放出的的量CO2 ,即可测知该植物材料的呼吸强度。测定植物释放CO2的量,可利用Ba(OH) 2溶液吸收呼吸过程中释放的CO2 ,然后再用草酸溶液滴定剩余的Ba(OH)2 ,从空白和样品二者消耗草酸溶液之差,既可算出呼吸过程释放的CO2量。
三、仪器试剂
1.器材:广口瓶呼吸测定装置、托盘天平、碱式滴定管、温度计。
2. 试剂:
1)草酸溶液
2)饱和氢氧化钡溶液
3)酚酞指示剂
3. 实验材料:刚萌发的小麦种子
四、实验步骤
1、取250mL广口瓶4个,用橡皮塞密封,塞下挂一尼龙窗纱制作的小篮,用于盛实验材料。装置如右图:
2、称取刚萌发的小麦种子5克两份,分别装入小篮内,将小篮子分别挂在已加有饱和Ba(OH)2溶液10mL的广口瓶内,立即塞紧瓶塞,防止漏气。每隔10分钟轻轻地摇动广口瓶,破坏溶液表面的BaCO3 薄膜,以利于CO2 的吸收,反应半小时。小心打开瓶塞迅速取出小篮,加入1~2滴酚酞指示剂,用草酸溶液滴定.直到红色消失为止,记录滴定用去的草酸溶液的体积。
3、另称取刚萌发的小麦5g两份,分别装入小篮内,放入加有一定体积水的250mL烧杯中,在电炉上加热煮沸10分钟,冷却后,将小篮子分别挂在已加有饱和的Ba(OH)2 溶液10mL的广口瓶内,按上述步骤进行测定,以此作为空白对照。
五、数据处理
项目
1
2
3(煮)
4(煮)
植物组织重(g)
5.0
消耗草酸体积(mL)
9.36
9.34
11.40
11.40
平均(mL)
9.35
11.40
呼吸强度(mgCO2/(g·h))
0.82
六、思考题
1.为什么要用煮死的幼苗来做空白试验
用煮死的种子做空白对照试验是为了减小环境误差
2.请列举出其他的植物呼吸速率的测定方法并评价它们的优缺点
水生植物可利用溶解氧浓度测定判断呼吸速率,这是因为水中CO2浓度测定不易,而水中氧浓度测定较简单。
陆生植物多采用测定密闭容器中CO2浓度的变化来确定植物呼吸速率,这是因为空气中CO2浓度的测定较为简单。
七、注意事项
1.将小篮挂在瓶盖下时,应避免与瓶中液体接触,否则会造成液体的损失,使所得值下降。
2.注意滴定过程的终点控制,不应滴过,以免数据过大。
3.打开瓶盖取出小篮时,动作要迅速。
4.在将活的小麦种子放入瓶中时,应尽量快,以避免漏气。并且,应每10分钟的摇动瓶子,以利于二氧化碳的吸收。
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