超滤法结合纳升液相色谱鄄串联质谱技术分析漏出性胸腔积-分析化学.pdf

第45卷 分析化学 (FENXI HUAXUE)摇 研究报告 第2期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2017年2月 ChineseJournal of Analytical Chemistry 224 ~230 DOI:10.11895/j.issn.0253鄄3820.160751 超滤法结合纳升液相色谱鄄串联质谱技术分析 漏出性胸腔积液中多肽组分 1 1 1 2 2 陈世范摇 杨静波摇 张敏摇 李晓鸥摇 刘晓峰 3 3 *1 郭宏华摇 何成彦摇 高洪文 1(吉林大学第二医院,长春 130041)摇 摇 (吉林省肿瘤医院,长春 130021)2 3(吉林大学中日联谊医院,长春 130041) 摘摇 要摇 漏出性胸腔积液中的多肽和蛋白质等生物分子直接或间接地与机体特定的生理、病理状态相关,反 映了肺部或者全身其它部位疾病的信息。 本研究利用超滤法将漏出性胸腔积液中的多肽组分进行分离,经脱 盐富集后,进行纳升液相色谱鄄串联质谱分析。 结果表明,在漏出性胸腔积液中共鉴定到来源于52种蛋白的 314条多肽,超过一半的肽段来源于纤维蛋白原,并且许多肽段具有阶梯序列的特征。 此外,在来源于胶原蛋 白和纤维蛋白原的多肽中还发现了大量的脯氨酸氧化修饰。 基因本体论富集分析显示,漏出性胸腔积液多肽 组分所属蛋白均具有胞外分泌的属性。 本研究给出了漏出性胸腔积液中多肽组的序列、等电点、分子量、翻译 后修饰等理化参数的分布特征,为进一步寻找肺部疾病相关的多肽标志物提供了可借鉴的参考数据和分析 方法。 关键词摇 多肽组;超滤;纳升液相色谱鄄串联质谱;漏出性胸腔积液 1摇 引言 胸膜腔是位于肺和胸壁之间的一个潜在的腔隙,正常情况下含有少量起润滑作用的液体。 胸腔积 [1] 液是胸膜腔内液体的产生和吸收失衡,致使过多的液体聚积形成 ,包含多种由血浆滤过及炎症或上 皮细胞释放的蛋白。 胸腔积液是临床上常见的征象,既可由胸膜疾病引起,也可由其它脏器病变产生。 [2] 根据其生化特性,胸腔积液分为漏出液和渗出液 。 漏出性胸腔积液常见于胸膜毛细血管内静水压增 高,如心力衰竭、缩窄性心包炎、血容量增加、上腔静脉或奇静脉受阻等,或者胸膜毛细血管内胶体渗透 压降低,如低蛋白血症、肝硬化、肾病综合征、急性肾小球肾炎、粘液性水肿等。 多是由于静脉回流受 阻,使得毛细血管内压增加,从而生成的大量组织液。 而渗出性胸腔积液多由炎症或恶性肿瘤引起。 胸腔积液中的多肽、蛋白质等生物分子直接或间接地与机体特定的生理、病理状态相关,反映了肺 部或者全身其它部位疾病的信息[3~5]。 相对于胸腔镜引导下的组织活检,获取胸腔积液对患者的损伤 很小,属于微创的方法。 因此,越来越多的研究将胸腔积液作为寻找与肺部疾病相关生物标志物的理想 来源。 随着现代质谱技术的发展,液相色谱鄄串联质谱技术已经成为转化医学研究中的主要工具,在寻 找特定疾病相关的蛋白、多肽、小分子代谢物等领域发挥着重要作用[6~8]。 目前,大多数的相关研究都 是针对渗出性胸腔积液(渗出液)中与特定生理病理相关的生物分子[9~11] ,鲜有针对漏出性胸腔积液 (漏出液)的研究报道,而对其中多肽组分的分析更是缺乏系统研究。 超滤技术是一种压力驱动的膜分离技术,其优点是操作简单,分离效率高,不涉及到相转移,无需添