水生植物抗性生理的研究——菹草对cd 离子胁迫的研究.docVIP

PAGE PAGE 1 水生植物抗性生理的研究 ——菹草对Cd离子胁迫的研究 韦程斌陈鸿宣扬 健薛静2005级理科强化班 摘要 本文旨在通过对水生植物在Cd离子胁迫下表现出的一系列生理生化特征进行描述和测量,展示重金属对植物的各方面影响.在实验过程中,选取了本地常见的水生植物菹草为研究对象,以Cd离子作为重金属污染因子,主要通过三个实验,得出相关数据,并归纳出植物在抗性上的一系列特点.最后从分子、细胞、组织等水平多方面讨论植物对重金属抗性及抗性机理.其中包括植物对重金属的抗性概念、举例, 抗性机理包括植物限制重金属离子吸收,重金属与体外分泌物结合,重金属的排除,根系富集,与细胞壁结合等 关键词 水生植物,重金属,抗性 由于工农业的不断发展,重金属污染己成为全球环境污染的一大源头.植物遭受重金属污染,不但影响其产量与品质,也影响大气和水环境质量,同时并可通过食物链危害人类的生命和健康.二十世纪以来,国内外许多科学家纷纷开展重金属一植物方面的研究.最初的研究集中在重金属在植物体内的吸收、积累、分布和形态方面.重金属可以经主动吸收或被动吸收进入植物体内.重金属不但可以直接对植物细胞造成伤害,而且可以诱导产生的大量活性氧,造成植物死亡的重要原因,其中目前学术界对活性氧中超氧阴离子自由基的毒害作用研究较多.铬是重金属污染中的主要污染物. 1材料处理与准备 1.1植物材料：菹草、菱 1.2材料处理 贮备液 大量元素 微量元素 Fe-EDTA KH2PO4 KNO3? Ca(NO3)2 MgSO4 用量（mL） 0.1 0.1 0.1 0.1 0.5 0.5 表1 Hogland 溶液配方 1.2.1 菹草的培养与重金属胁迫处理： 根据表1配Hogland 溶液,加入100mL左右自来水,混匀后,再加入重金属物质CdCl2,自来水定容到500mL,其中CdCl2以0、5、10、20mg/L三个浓度处理. 室温培养7d ,自然光,每天补充自来水,观察并记录,留材料备用. 1.2.2菱角的培养： 在菱角收获时置于容器水中,低温储存.春季置于光照培养箱中适温水培,设置昼夜温度分别为28℃和20℃,昼夜光照时间为12h,昼夜光强为250umol·E/M·M·S,促其发芽. 将发芽的菱角置于大容器中,加入适量Hogland 溶液,继续光培,7天更换一次营养液. 2.实验方法： 2.1叶绿素含量的测定（分光光度法） 2.1.1目的：了解逆境条件（重金属Cd污染）下植物体叶绿素含量的变化. 2.1.2操作： 将菹草从顶端起取倒数第三对叶片;叶片洗净、吸干、称重后于研钵中加入5mL80%丙酮、少许石英砂和碳酸钙,研磨匀浆后过滤,再用5mL80%丙酮冲洗滤渣;4000g离心,得叶绿素提取液.充分过滤后,采用754型光光度计,以80%丙酮调零,测定叶绿素提取液在645nm和663nm处的光吸收值. 2.13计算(根据张志良法)： 叶绿素a（mg/gFW)：C=12.21A663-2.81A645 叶绿素b（mg/gFW)：C=20.13A645-5.03A663 2.2植物组织伤害程度的测定（细胞膜透性）： 2.2.1目的：了解重金属胁迫对质膜的损伤. 2.2.2操作： 取相同部位的叶片洗净吸干称重0.1g剪碎,加双蒸水20ml,真空抽气10min,取出静置1h,用电导仪测溶液电导率S1.将试管盖封口,100℃沸水浴15min,冷却10min,在20-25℃恒温下测其煮沸 2.23计算： 相对电导率（L）= 2.3植物组织膜脂过氧化产物的测定（MDA法） 2.3.1目的：了解重金属胁迫下植物组织膜脂过氧化的程度. 2.3.2操作： 0.1g植物叶片洗净、擦干、剪碎,置于研钵中加少许石英砂、5mLTCA（分次）,研磨匀浆后转移至离心管.4000 rpm离心10min,上清液即为样品提取液.2mL提取液+2mL TBA,混匀,沸水浴15min,迅速冷却.另取２mLTCA+2mLTBA同样操作,为对照液.反应液3500rpm离心15min,取上清液,测量体积（Ｖ）,以对照液调零,测定5