实验五 尿hcg检测（金标法）及家兔心脏采血.pptVIP

主讲：胡荣 Part1 尿HCG检测 （金标法） 实验五 HCG概述 1、HCG（人绒毛膜促性腺激素）； 2、是妊娠期胎盘滋养层细胞分泌的糖蛋白激素，有α和β两种亚基，α亚基与卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）和促甲状腺素（TSH）相似，β亚基是其特有的； 3、妊娠后体内浓度增加； 4、β-HCG是诊断滋养层细胞肿瘤敏感性最高的标志物。 （一）免疫层析试验双抗体夹心法测尿HCG原理图 A处：吸水材料 B处：滴加尿液 C处：金标抗α-hCG单抗（来源于小鼠） T处：包被抗β-hCG单抗 R处：包被抗小鼠IgG 阳性：T\R两条带； 阴性：R一条带 B C T R A （二）试剂及器材 胶体金早早孕检测试纸、尿标本（晨尿最佳） （三）实验方法 1、待测样品、检测试纸平衡至室温。 2、将测试纸有箭头的一端插入尿液标本中（不可超过MAX标志线），5秒后取出平放，5分钟内观察显示结果。 （四） 结果报告 姓名 ；尿HCG 。 免疫复合物沉淀 前带 游离抗体 游离抗原 - - - - - - - - - - + + + + + - - + + + 等价带 后带 加入抗原 着丝点 B B B B B B A A A A A Bf C2 C DR DP DQ C4 HLA复合体 第6号染色体短臂 HLAⅡ类基因区 HLAⅠ类基因区 HLAⅢ类基因区 HLAⅠ类分子 HLAⅡ类分子 肽结合区 免疫球蛋白样区 跨膜区 胞浆区 抗体 稀释 抗原稀释 不稀释 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 不稀释 4＋ 4＋ 4＋ 3＋ 3＋ 2＋ ＋ ＋ ＋ 1:2 2＋ 4＋ 4＋ 3＋ 3＋ 2＋ ＋ ＋ ＋ 1:4 ＋ ＋ 3＋ 3＋ 2＋ ＋ ＋ ＋ 1:8 ＋ ＋ 3＋ 2＋ ＋ ＋ 1:16 2＋ 3＋ ＋ ＋ 1:32 ＋ 2＋ 2＋ ＋ 1:64 ＋ 2＋ 注：表中红色者表示出现沉淀最快，二者最适比例始终是1:4。 （五） 注意事项 1.当HCG浓度很高时，检测线颜色可能变浅； 2.灵敏度不高； 3.酒精可能干扰实验结果，不宜饮酒后使用； 4.子宫肌瘤、葡萄胎或更年期HCG含量较高， 可能会出现阳性结果。 主讲：胡荣 Part2 家兔心脏采血 实验材料 一次性塑料手套、剪刀、碘酒、酒精、注射器（20mL）、大试管4支（清洁、干燥，自己准备） 实验对象 已免疫伤寒杆菌“O”抗原的家兔【每班12只】