Q_SACF 04-2019复合肥料中γ-聚谷氨酸含量的测定 柱前衍生-高效液相色谱法.pdf

中国- 阿拉伯化肥有限公司企业标准 Q/SACF 04—2019 复合肥料中γ-聚谷氨酸含量的测定 柱前衍生-高效液相色谱法 Comp lex fertilizers-Determination of γ-polyglutamic acid content Precolum Derivation-High Performance Liquid Chromatography 2019-04-08 发布 2019-04-08 实施 中国-阿拉伯化肥有限公司 发布 Q/SACF 04—2019 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由中国-阿拉伯化肥有限公司提出并归口。 本标准主起草单位：中国-阿拉伯化肥有限公司、北京化工大学秦皇岛环渤海生物产业研究院、北 京化工大学。 本标准主要起草人：徐 晗，曹 辉，王 斌，杨振军，梁红江。 本标准首次发布。 I Q/SACF 04—2019 复合肥料中γ-聚谷氨酸含量的测定 柱前衍生-高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了复合肥料中添加的微量γ-聚谷氨酸含量的测定方法。 本标准适用于复合肥料中添加微量γ-聚谷氨酸的含量测定，其他含有γ-聚谷氨酸的产品 可参考执行。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用成为本标准的条文。凡是注日期的引用文件，其随 后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准 达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版 本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 原理 γ-聚谷氨酸水解为谷氨酸，以2,4-二硝基氯苯作为柱前衍生剂，衍生产物在360 nm 处 有最大紫外吸光度。流动相为：磷酸盐缓冲溶液和甲醇，梯度洗脱。高效液相色谱分离，紫 外检测器检测，色谱峰保留时间定性，外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的一级水。 4.1 试剂 4.1.1 甲醇(CH OH)：色谱纯。 3 4.1.2 硼砂溶液（0.01 mol/L ）：称取1.9069 g 硼砂，加入适量水溶解，用水稀释至500 mL， 混匀。 2 Q/SACF 04—2019 4.1.3 磷酸二氢钾溶液（0.02 mol/L ）：称取2.5218 g 磷酸二氢钾，加入适量水溶解，用水 稀释至1 L，混匀，经0.22 μm 水相微孔滤膜过滤，超声脱气15 min 后备用。 4.1.4 盐酸(HCl) ：ρ =1.19 g/mL 。 4.1.5 2,4-二硝基氯苯 （C H ClN O ）：纯度≥98% 。 6 3 2 4 4.1.6 聚谷氨酸标准品 聚谷氨酸标准品（又叫“聚2-氨基戊二酸”，Poly(glutamic acid) ，L-Glu-(L-Glu)n-L-Glu， CAS 号：25513-46-6 ）：纯度≥98.5%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。 4.1.7 聚谷氨酸标准贮备液(10.0 mg/mL）：准确称取聚谷氨酸标准品0.1 g,精确至0.0002 g, 于10 mL 容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，混匀。4 ℃保存，有效期1 个月。 4.1.8 聚谷氨酸标准中间液（1.0 mg/mL ）：移取聚谷氨酸标准贮备液 （4.1.7 ）1