生物化学技术6 凝胶过滤11教材课程.pptVIP

第六章 凝 胶 过 滤; 凝胶过滤是20C-60Y发展起来的一种分离纯化方法；又称分子筛层析、排阻层析 　原理：凝胶具有网状结构，小分子物质能进入其内部，而大分子物质却被阻挡在外部，从而使混合溶液中各种组分按分子质量不同进行筛分 　特点：设备简单，操作方便、重复性好、回收率高 　用途：分离纯化蛋白质、核酸、多糖、激素等，测定蛋白质分子质量、样品的浓缩和脱盐等 ;目 的;第一节 凝胶的分类及性质 ;;;　商品名称：Sephadex，由葡聚糖[右旋糖酐(G型)]和3-氯-1，2环氧丙烷(交联剂)以醚键交联??成 　 在交联葡聚糖G-25、G-50中加入羟丙基后，即可构成烷基化（LH型）葡聚糖凝胶 ;;①性状：外观为白色珠状颗粒，在显微镜下可见表面为网状皱纹 ②溶解性：带有大量的羟基，亲水性好，因此在水溶液或电解质溶液中极易膨胀 ③型号：Sephadex G-n（n越大，则交联度越小，而膨胀度、吸水量和筛孔直径则越大 ④应用：;　 在水溶液、盐溶液、碱溶液、弱酸溶液和有机溶剂中是稳定的、不溶解的 　　强酸或氧化剂溶液时，则容易使糖苷键水解断裂 　 在室温下长期保存时，应加入适量的防腐剂如CHCl3、0.05％NaN3或20％EtOH等 ;　含少量的羧基基团，为弱酸性物质。能与带正电荷的分离物如碱性蛋白质等发生吸附 　克服方法：提高洗脱液的离子强度至0.05以上，可