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第十五章 基因表达(真核) 基因的活化→转录→转录后加工→mRNA转运到细胞质→翻译→翻译后加工 基因表达的调控 适应环境、维持生长和发育需要 主要是转录水平的调控 第一节 适应外界条件的变化 方式：诱导合成(正调控)或阻遏合成(负调控)一些相应的蛋白质 特点：转录与翻译偶联，快速 调控机制——操纵子 乳糖操纵子——可诱导操纵子，负、正调控 转录起始的调控 色氨酸操纵子——可阻遏操纵子，负调控 　 转录起始、终止的调控 操纵子(operon) 1. 乳糖操纵子的结构和诱导剂 乳糖操纵子的发现：细菌可以以葡萄糖、 乳糖作为碳源 葡萄糖充分时： 与葡萄糖代谢有关的酶基因——表达 与其他糖代谢有关的酶基因——关闭 葡萄糖耗尽、乳糖存在时(培养基)： 与乳糖代谢有关的酶基因——表达 与葡萄糖代谢有关的酶基因——关闭 2. Lac阻遏物的作用 Lac阻遏物由基因I编码 结构特点：具有4个相同亚基，每个亚基中都有 一个与诱导剂结合的位点 调控机制： 负调控 无诱导剂时：Lac阻遏物与O基因结合，结构基因关闭 有诱导剂时：Lac阻遏物与诱导剂结合，阻遏物构象改 变，从O基因上解离，结构基因开放，RNA 聚合酶结合，转录开始 生理性诱导剂：别位乳糖(allo-lactose) 实验常用诱导剂：异丙基硫代半乳糖(IPTG) 葡萄糖存在时：优先利用葡萄糖作为能源 分解物阻遏作用(catabolite repression) 葡萄糖的分解产物对其他酶的抑制效应，与cAMP有关 葡萄糖↑→cAMP↓→乳糖操纵子 加入外源cAMP↑→乳糖操纵子 CAP-cAMP复合物的激活作用 CAP(catabolite gene activator protein)：有两个相同亚基的蛋白质，都具有与DNA结合的结构域和与cAMP结合的结构域 cAMP＋CAP→CAP-cAMP复合物→乳糖操纵子 调控机制：正调控 原核生物基因(乳糖操纵子)表达调控的一般情况 环境条件的变化是相关基因表达的外界信号 葡萄糖、乳糖浓度的变化 基因表达的负调控(negative regulation) Lac阻遏物与操纵基因O结合后抑制了结构基因的表达 基因表达的正调控(positive regulation) CAP-cAMP复合物与相应的DNA序列结合后促进基因的表达 衰减子(attenuator) L基因5’端部分的140核苷酸序列，离E基因5’端约30~60bp 无或低Trp时：转录出全长序列的多顺反子mRNA 高Trp时：衰减子起作用，只有L基因5’端的140nt的转录产物生成，转录终止 通过衰减子转录物形成(转录终止结构)使转录终止 Trp-tRNATrp 存在 核糖体通过片段1(2个Trp密码子) 封闭片段2 片段3, 4形成发夹结构 类似于不依赖ρ因子的转录终止结构 RNA聚合酶作用停止，产生前导mRNA转录产物 产生前导肽 Trp-tRNATrp 缺乏 核糖体翻译停顿在片段1的2个Trp密码子处 片段2, 3形成发夹结构 RNA聚合酶转录不终止，继续转录 产生前导肽、酶蛋白 第二节 真核生物调控的特征：转录的激活与被转录区域的染色质结构变化有关 1. 环境信号转导→染色质活化→转录的激活 2. 基因表达以正调控为主(活化蛋白激活靶 基因) 3. 转录与翻译在不同的亚细胞区域进行 一、具有转录活性的染色质结构的变化 组成性基因表达 管家基因(housekeeping genes)表达是比较恒定的，其转录产物在所有的组织细胞中都存在 可调控的基因表达 有些基因的表达会因为细胞对信号分子的反应而发生变化 二、参与基因调控的顺式作用元件和反式作用因子 CpG岛 组成性表达基因和部分可调控基因的5’末端调控区存在一段富含成对的胞嘧啶、鸟嘌呤(CpG)的序列，启动子中去甲基化的CpG岛对基因转录起始是必需的。 一类能增强真核细胞某些启动子功能的顺式作用元件(DNA序列) 增强子作用不受序列方向的制约 有组织特异性 特点： 具有较短的保守序列 与转录起始点的距离不固定 可位于启动子或增强子内 2. 反式作用因子(trans-acting factors) 一类在真核细胞核中发挥作用的蛋白质因子