（课件）免疫组化.pptVIP

三、阳性标记组织学特征（以HRP-DAB/H2O2为例） 免疫组化染色阳性细胞在组织中的分布排列形式可以有如下7种：①局灶型；②弥漫型；③片块型；④网状型；⑤腺管型；⑥腔缘型和⑦菊团型，等。这主要取决于抗原抗体复合物在细胞内的分布和阳性细胞在组织内的群体分布特点。 四、阳性标记强度特征 依照细胞阳性着色程度（抗原含量），可分为弱阳性（+）┅1分；中等阳性（++）┅2分；强阳性（+++）┅3分。依照阳性细胞数量，可分为：弱阳性（+ ，指阳性细胞总数在25%以下）； 中等阳性（++,指阳性细胞总数在25%—49%)；强阳性（+++ ，指阳性细胞总数在50%以上)。目前多采用积分综合计量。计算公式为：（+）%x1 +（++）%x2+（+++）%x3；总数值1.0者为（+），1.0-1.5者为(++),1.5者为(+++)。至少随机观察5-10个HPF。 第五节 染色失败的可能原因 免疫组化染色的基本要求有二：①实验切片的阳性抗原定位准确，呈色鲜明，背景着色浅或无，二者的比值应大于1（阳性/背景）；②对照染色的结果应附合要求。否则，所得实验结果都是错误的，或为假阳性或为假阴性。 假阳性是指实验切片呈阳性，阴性组织对照或阴性试剂对照也呈阳性的结果，谓之假阳性。其原因与内源性干扰，试剂不纯，交叉反应等有关。 假阴性是指实验切片呈阴性，阳性组