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微生物的遗传与变异(Ⅱ) 本次课重点 遗传信息的转录过程 (DNA→RNA) 遗传信息的翻译过程 (RNA→Pr) 基因表达的调节(操纵子模型) 四、 翻译后加工 (一)切割 (二)修饰 (三) 新生肽链的折叠 1. 去除N末端蛋氨酸残基 2. 信号肽及其他肽段的切除 1. 二硫键的形成 2. 辅助因子的连接和亚基聚合 3. 多肽链中个别氨基酸的修饰 * * 蛋白质的生物合成 遗传信息的传递与表达过程 一 蛋白质生物合成体系 DNA mRNA 蛋白质 一、 mRNA(messenger RNA) —— 蛋白质生物合成的直接模板 一、 mRNA mRNA分子中每三个相临碱基组成一个 密码子,代表一种氨基酸,或起始信号, 或终止信号。 mRNA上的四种碱基可组成64(43)个密码子, 其中61个代表不同的氨基酸,其余三个 代表终止信号。 单顺反子:真核生物中,一条mRNA链只能为一种蛋白质编码 。 多顺反子:原核生物中,一条mRNA链往往为功能相关的几种蛋白质编码 。 二、 tRNA(transfer RNA) — 蛋白质生物合成的 “高级搬运工” tRNA的功能 特定的tRNA搬运特定的氨基酸, 保证了遗传信息传递的准确性。 即tRNA能与专一的氨基酸结合并识别 mRNA分子上的密码子. 一种tRNA仅转运一种氨基酸, 而一种氨基酸可由几种tRNA转运。 tRNA搬运功能的忠实性是通过以下 两条途径实现的: tRNA的反密码子识别mRNA的密码子。 不同的tRNA有不同的碱基组成,并由 不同的氨基酰tRNA合成酶识别。 既能识别特异的tRNA, 又能识别特异的氨基酸。 在大肠杆菌中,与Met特异结合的tRNA有两种: tRNAfMet 和 tRNAMet CH3 S CH2 CH2 CH H2N COO tRNAfMet 转甲酰基酶 N10-CHO-FH4 CH3 S CH2 CH2 CH H-C-HN COO tRNAfMet O Met-tRNAMet上的Met则不被甲酰化! tRNAiMet: 真核细胞中起始tRNA,不被甲酰化 三、核糖体(ribosome) —— 蛋白质生物合成的场所 组成、结构与功能特点: 1. 结构复杂而精密 由3种的rRNA(占60%左右) 及数十种蛋白质组成。 2. rRNA起着主导的作用,蛋白质 协助维持rRNA的功能区域。 3. 转肽酶是RNA而不是蛋白质。 Et Ep P mRNA mRNA 结合位点 细胞 内膜 系统 三、核糖体 — 蛋白质生物合成的场所 A:受位,氨基酰位; P:给位,肽位; Et:tRNA出口 Ep:多肽链出口; T:转肽酶。 A T 四、 参与蛋白质生物合成的其他组分 1. 氨基酰tRNA合成酶 2. GTP,ATP 3. 起始因子(IF) 4. 延长因子(EF) 5. 释放因子(RF) …… 或称为终止因子(TF) 第二节 蛋白质生物合成过程 一、 氨基酸的活化与转运 二、多肽链的形成—核糖体循环 三、翻译后加工 一、 氨基酸的活化与转运 氨基酰tRNA 合成酶 ATP PPi H2N-CH-C-OH H2N-CH-C-AMP-E H2N-CH-C~O-ACC-tRNA R O 氨基酰tRNA合成酶 高度特异性 氨基酰tRNA 合成酶 tRNA 氨基酸 tRNA 消耗2个高能磷酸键 二、核糖体循环(ribosome cycle) 活化氨基酸在核糖体上缩合形成多肽链的过程 1. 起始 2. 肽链延长 3. 终止 (一) 起始阶段 起始氨基酰-tRNA 与 mRNA 结合到核糖体上,形成起始复合物的过程 原料:fMet-tRNA,IF(1,2,3),GTP,Mg2+ 1. 小亚基识别并结合mRNA 30S 50S 50S + mRNA 30S 小亚基识别并结合mRNA起始密码子上游10nt富含 嘌呤碱基的SD序列,IF3加固这一作用。 IF-1 IF-3 小亚基的16S rRNA 3′端的UCCU序列 解聚 2. fMet-tRNAfMet与小亚基结合 fMet IF-2, 3. 大小亚基聚合 IF-3 GDP+Pi 50S 起始复合物 GTP AUG AUG fMet AUG fMet AUG fMet IF
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