4.3特殊变异菌的筛选方法.pptVIP

* 4.3 特殊变异菌的筛选方法： 以温度敏感突变为例： 筛选方法： 用途：常用于提高代谢物产量 原因：是由于某一酶蛋白结构改变后，在高温下活力丧失 重要性：如果此酶为蛋白质、核酸合成途径中所需的酶，则此变异株在高温下的表型就是营养缺陷型。 4.3.1条件抗性突变型的筛选 举例： 由谷氨酸产生菌乳糖发酵短杆菌2256，经诱变处理得到温度敏感变异株Ts88: 30℃培养时能正常生长 40℃是死亡，但能在富含生物素的培养基中积累谷氨酸（而野生型却受生物素的反馈抑制）。 在富含生物素的培养基中进行发酵时： 先在30℃（允许条件）中进行培养以得到大量菌细胞，适当时间后提高温度（ 40℃ ，非允许条件），即能获得谷氨酸的过量生产。 方法：梯度平板法（gradient plate） 4.3.2抗药性突变株的筛选 抗药性突变株的应用： 作为菌株的遗传标记 作为生产菌种（结构类似物抗性变异株） 4.3.3抗生素抗性变异株的筛选： ★与营养缺陷突变有关的三类遗传型个体： 营养缺陷型：经诱变产生的一些合成能力出现缺陷，而必须在培养基内加入相应有机养分才能正常生长的变异菌株。如：lys -， bio- 野生型：自然界分离到的任何微生物，在其发生营养缺陷突变前的原始菌株，为该微生物的野生型。 如：lys + ; bio + ; 原养型 ：指营养缺陷型突变菌株回复突变