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普通光学显微镜的使用及微生物制片及染色技术 实验目的：1、学习普通光学显微镜的使用方法. 2、 学习掌握单?染色的操作技术和无菌操作技术。 3、 了解革兰氏染色机理，并掌握其操作技术。 4、 掌握划线分离纯化微生物的原理与方法 实验材料:1 实验材料: 1、器材：灭菌棉签（装在试管内），试管架，记号笔 和废物缸、培养皿、试管、三角烧瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、 培养基、分装器、天平、牛角勺、高压蒸汽灭菌锅、 ph试纸、棉花、牛皮纸、麻绳、锥形瓶、洗瓶、载玻片、接种杯、 酒秸灯、擦镜纸、显微镜 2、 染色液和试剂：牛肉膏、蛋白豚、NaCl.琼脂盐酸溶液、轼氧化钠溶 液、无菌水、结晶紫、95%酒精、蕃红、碘液 3、 活材料：枯草杆菌、培养24小时的大肠杆菌、金黄色衞萄球菌 三、实验原理： 1、 用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染 料的离子带止电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当 它牛长丁中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采丿IJ碱性染料 如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等）使其着色。酸性染料离子带负电荷， 能与带正电荷的物质结合。当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时，细菌所 带正电荷增加，因此易被伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料着色。中性染 料焰前两者的结合物又称复合染料，如伊红美蓝、伊红天青等。 2、 简单染色法是只用一