异源表达聚酮类化合物前体的研究进展-生物通--------专注生.PDFVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２，３２（１１）：１０７１１４ 异源表达聚酮类化合物前体的研究进展 段月娇　薛超友　卢文玉 （天津大学化工学院系统生物工程教育部重点实验室　天津　３０００７２） 摘要　聚酮类抗生素因其重要的生物活性在临床上广泛应用。该类化合物主要由微生物代谢生 成。然而由于合成聚酮化合物的天然菌株存在各种限制，影响着聚酮化合物的高效生产与应用。 通过聚酮化合物的异源表达可以有效解除这些限制，目前成为研究热点。聚酮化合物异源表达 的一个关键限制性因素是胞内前体物质供应不足。概述了在典型异源表达宿主菌中提高聚酮化 合物前体供应的策略：通过对前体合成途径的重新改进或者引入到异源表达宿主菌中重构代谢 网络、过表达外源前体合成途径、抑制旁支代谢流、敲除内源性次级代谢产物代谢途径，提高前体 供应。为异源表达聚酮化合物的研究及工业化生产提供借鉴。 关键词　聚酮化合物　异源表达　前体供应 中图分类号　Ｑ８１２ 　　聚酮化合物是一类重要次级代谢产物，由细菌、真 肪酸合酶催化脂肪酸合成途径相类似。通常包括起始 菌、放线菌或植物通过低级羧酸如乙酸、丙二酸、丁酸等 单元选择、碳链延伸、酮基还原、芳香化及环化等多种 连续脱羧缩合形成，其合成途径类似于长链脂肪酸。因 酶促合成步骤。其起始单位存在很大差异，最常用的 其重要的生物活性在临床上作为抗生素而得到广泛应 为乙酸、丙酸、丁酸，少数用对氨基苯甲酸（如杀假丝菌 用，如红霉素、抗癌药物多柔比星、抗真菌剂两性霉素、抗 素）；延伸单位常为乙酸、丙酸、丁酸，合成终产物的甲 寄生虫剂阿维菌素、杀虫剂多杀菌素以及免疫抑制剂雷 基或乙基侧链。 帕霉素等。聚酮化合物药学上的应用使其生物合成途径 ［４］ 　　目前ＰＫＳ大体可以分为三类 。Ｉ型ＰＫＳ也称为 的研究成为热点。近来放线菌的基因组测序，特别是一 模块式ＰＫＳ，由大量的酶复合体组合形成催化亚基模 些次级代谢产物合成基因簇的确定为临床抗生素的研究 块。这些模块独特、非重复、线性排列在合成聚酮化合 ［１］ 提供了有利条件 。目前这些抗生素的研究集中于两个 物的装配线上，主要合成大环内酯类、聚醚类、多烯类 方面：第一，相关基因簇在原始菌株中的表达；第二，相关 和安莎类聚酮化合物。ＩＩ型ＰＫＳ（芳香族类型）由４～６ ［２］ 基因簇在外源宿主菌中的异源表达 。第一种策略依赖 个单功能或双功能酶组成，每一种酶在合成过程中多 于经验、培养条件以及菌株的基因工程改造，不同的放线 次被用来催化相同的反应。一般来说，ＩＩ型ＰＫＳ的起 菌差异很大。第二种策略涉及基因簇在外源宿主菌中的 始单位均为乙酰 ＣｏＡ，合成具有芳香环结构的聚酮类 异源表达，近来在基因测序方面的进展为基因簇的合成 化合物。ＩＩＩ型ＰＫＳ为查尔酮合成酶类，是一个可重复 提供了良好契机，该方法可以应用于难以培养的菌株。 使用的同源二聚体蛋白，直接催化泛酰辅酶Ａ间的缩 １　聚酮化合物合成途径 合，不需要ＡＣＰ。 ［３］ 　　聚酮化合物由聚酮合酶（ＰＫＳ）催化合成 ，与脂 ２　聚酮化合物的异源表达 收稿