2020届高三生物复习专题《蛋白的相互作用》.docx

1.（16分）(2015届海淀一模) 科研人员以酵母菌为受体细胞，通过转基因技术研究水稻某种病毒的蛋白P与水稻蛋白的相互作用。 （1）实验所用的缺陷型酵母菌不能合成组氨酸、色氨酸和亮氨酸，培养时在培养基中需添加上述氨基酸，为酵母菌细胞内________上合成________提供原料。 （2）将蛋白P基因与质粒K（具有色氨酸合成基因及BD蛋白合成基因）连接，构建重组质粒K。将重组质粒K导入缺陷型酵母菌，用不含________的培养基筛选转化的酵母菌获得菌落，从这些菌落中可筛选得到基因成功________BD-P蛋白的酵母菌A。 （3）为研究蛋白P能够和哪些水稻蛋白发生相互作用，科研人员提取水稻细胞的mRNA，在________酶作用下获得cDNA，再与质粒T（具有亮氨酸合成基因及AD蛋白合成基因）连接形成重组质粒T，构建水稻cDNA文库。 （4）在酵母菌细胞内，组氨酸合成基因的转录受到调控，如下图所示。若被测的水稻蛋白能与病毒蛋白P发生相互作用，BD、AD两个蛋白充分接近时，_________才能催化组氨酸合成基因转录。 （5）将酵母菌A分别接种到不含组氨酸和不含亮氨酸的培养基中，以确定转入重组质粒K后酵母菌A________。取水稻cDNA文库的多个重组质粒T分别转化到酵母菌A中，将转化产物接种在不含________的培养基中培养，获得了分散的多个单菌落。经检测这些酵母菌中含有4种水稻蛋白，表明这4种水稻蛋白能够________。 （6）研究发现，这4种水稻蛋白都是水稻不同代谢过程中的关键酶，推测该病毒引起水稻出现各种病症的原因之一可能是______。 1. （除注明外，每空2分，共16分） （1）核糖体 蛋白质 （2）色氨酸（1分） 表达（或“指导合成”） （1分） （3）逆转录 （4）RNA聚合酶 （5）组氨酸和亮氨酸合成未被激活 组氨酸、色氨酸、亮氨酸（1分） 与蛋白P相互作用（1分） （6）通过蛋白P作用于代谢关键酶，干扰细胞的代谢 2.（2019届东城一模）植物对病原微生物的防御反应包含多种物质介导的多条途径,其中水杨酸（SA）和茉莉酸（JA）可以诱导植物合成防御素等物质，引发防御反应。 （1）科研人员选用野生型和E3基因功能缺失突变体拟南芥，分别用一定浓度的SA、JA溶液处理，然后从各组植株中提取_________，反转录形成cDNA，再运用______技术扩增，进而检测防御素合成关键基因PDF的转录水平，结果见图1。 野生型的实验结果可说明，SA和JA对PDF基因转录的作用存在______关系。比较两组实验结果可知SA和JA的作用与E3有关。 科研人员构建含有E3基因的Ti质粒，利用___________法将其导入E3功能缺失突变体拟南芥，重复上述处理后进行测定。若实验结果为__________________，则支持上述结论。 （2）PDF基因转录过程需要ORA蛋白激活。科研人员依据以下原理研究了E3蛋白与ORA蛋白之间的关系。原理如下：在酵母菌细胞中，可以利用基因工程表达出两种融合蛋白（BD—待测蛋白X、AD—待测蛋白Y）。如图2a，若两种待测蛋白可以相互作用，则AD蛋白和BD蛋白就能充分接近形成复合物，并启动组氨酸合成基因的转录；否则组氨酸合成基因不能转录（如图2b）。 由此，科研人员构建两种重组载体（见下表），将它们导入不能合成亮氨酸、色氨酸和组氨酸的缺陷型酵母菌中。 重组载体包含的部分基因 载体1 AD蛋白基因 E3蛋白基因 亮氨酸合成基因 载体2 ① 基因 ② 基因 色氨酸合成基因 上表中的相应基因分别为①____________；②____________。 将转基因酵母菌接种到不含亮氨酸、色氨酸和___________的固体培养基上进行培养，观察到____________，说明E3蛋白可以与ORA蛋白相互作用。 （3）科研人员进一步研究SA在调控PDF基因转录过程中与E3和ORA的关系，结果如图3、图4所示。 分析图3可知， SA可以促进ORA基因转录，且该过程与E3无关。判断依据：与对照组相比，SA处理后的野生型和突变体中的ORA基因转录量______________。 研究还发现，SA可以使E3蛋白增多。结合（2）结论和图3、图4，推测SA调节ORA蛋白量的机制是_____________，进而调控PDF基因的转录过程。 2.（18分） （1）RNA PCR（1分） 拮抗 农杆菌转化 PDF基因转录量相对值与野生型组相似 （2）BD蛋白 ORA蛋白 （两空都写对得2分） 组氨酸（1分） 酵母菌菌落 （3）增加且增加的量没有显著差异 SA使E3蛋白增多，E3蛋白与ORA