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黄体 在黄牛、奶牛黄素多,黄体呈黄色;水牛黄体在发育过程中呈粉红色,萎缩时变成灰色 一般观察法 主要观察动物的外部表现和精神状态 发情前期,产奶量下降,外阴部光滑肿胀,湿且红,阴道流出透明的粘液,并爬跨其他牛 发情中期,母牛阴道流出的粘液呈半透明状、量多,接受其它牛爬跨、拒食,产奶量继续下降 进入发情后期约12h,母牛阴道流出粘液变得粘稠,色灰暗,拒绝其它牛爬跨,奶量回升,正常采食 试情法 一般在20-30头母牛群中放入1头试情公牛,然后根据母牛的反应来判断。发情前期,产奶量下降,外阴部光滑肿胀,湿且红,阴道流出透明的粘液,并爬跨其他牛。 阴道检查法 将阴道开张器或阴道扩张筒插入并扩张阴道,借用光源观察阴道黏膜颜色、充血程度,子宫颈松弛状态、外口颜色、充血肿胀程度及开口大小,分泌液的颜色、粘稠度及量的多少、有无黏液流出等来判断发情的方法。 人工授精(AI) 采精:2-3次/周,连续采精2次; 精液稀释,精液保存 输精:阴道或子宫颈,0.3-0.5亿精子 受精前的准备 精子:获能,顶体反应; 卵子:卵子的接纳与运行;第二次成熟分裂 受精:精子穿过放射冠,精子穿过透明带,精子进入卵黄 皮质反应,卵黄膜反应和透明带反应 外部观察法 周期发情停止 食欲增进 营养状况改善 毛色润泽光亮 性情变得温顺 行为谨慎安稳 阴道检查法 直肠检查法 通过直肠触诊卵巢、子宫、子宫动脉的变化 孕体是否存在而进行判断 B超在奶牛早期妊娠中的诊断 乳房结构 乳腺基本结构 (一) 实质 组成:腺泡系、乳管系、乳池、乳头 功能:合成、分泌、排乳 (二) 间质 构成:纤维结缔组织、脂肪组织 功能:保护、支持腺体组织 包含:血管、淋巴管、神经和韧带等 乳腺结构 泌乳的发动 泌乳 乳腺腺泡上皮细胞从血液中摄取营养物质生成乳汁,并分泌入腺泡腔内的生理过程。 泌乳的发动 一、泌乳的发动 第一阶段:酶活性增加,细胞器分化; 第二阶段:乳成分急剧分泌。 泌乳的维持 稳定的环境,充分的饲料供应,有规律的吮吸或者挤奶,适当的管理,依赖于激素的整合和神经系统的综合调控。 排乳 乳汁在腺泡上皮细胞内形成后,连续分泌入腺泡腔。当乳汁充满腺泡腔和细小乳管时,依靠腺泡腔周围的肌上皮和输乳管平滑肌的反射性收缩,将乳汁周期性地转移到乳导管和乳池内。当乳头和乳房皮肤受到适当刺激(如挤奶或哺乳)时,乳汁由乳导管及腺泡排出,这一过程称为排乳。 排乳过程 最先排出的乳是乳池乳 腺泡和导管内的乳必须由排乳反射的作用才会排出,这些乳称为反射乳 乳牛的乳池乳一般约占泌乳量的1/3~1/2,反射乳约占泌乳量的1/2~1/3 一、意义 畜禽扩群(增加种畜禽数量) 育种(提高种畜禽质量) 保种(保护动物多样性) 引种(优良种畜禽交流) 医学(生物制药与治疗) 规模化生产(繁殖控制技术) 二、我国胚胎工程技术发展历程 试验研究阶段(70年代初~80年代中) 发展提高阶段(80年代中~90年代初) 生产应用阶段(90年代初~至今) 目前正向产业化方向发展 三、我国牛胚胎移植里程碑 鲜胚移植:中国科学院遗传所和上海市牛奶公司,1978 胚胎超低温冷冻保存:中国科学院遗传研究所和上海市牛奶公司(1982)。牛玻璃化冷冻胚胎保存:桑润滋、朱士恩等(1998) 胚胎分割 窦忠英等(1987)分割牛胚胎产犊 谭丽玲、廖和模等(1989)分割奶牛胚胎产同卵双犊 谭丽玲、桑润滋等(1989) 将1/2分割的奶牛半胚移植于黄牛产同卵双犊 牛冷冻胚胎(1/2)分割 郭志勤等(1989):产同卵双犊 柏学进等(1996):将分割后的半胚裸露冷冻保存产犊 桑润滋、朱士恩、吴德国等(1999):分割玻璃化冷冻牛胚胎产犊 牛新鲜胚胎(1/4)分割 谭丽玲、李乐义等(1992):鲜胚1/4分割产犊 窦忠英等(1992):四分胚产同卵三犊 牛体外受精 旭日干等(1989):卵巢卵母细胞体外受精成功产犊 江金溢等(1990):将牛体外受精胚胎冷冻获得成功 桑润滋、朱士恩等(1999):将牛体外受精胚胎经玻璃化冷冻保存产犊 胚胎性别鉴定 曾溢滔、胡明信等(1992):通过PCR直接扩增牛胚胎的SRY特异DNA序列鉴定牛胚胎性别,准确率达100% 罗应荣等(1992):应用上述方法鉴定牛胚胎性别准确率达82% 细胞核移植(克隆) 胚胎细胞核移植:李雪峰、谭丽玲等与广西农业大学合作(1996)获得体外培养发育至8~32细胞核移植的1头克隆牛 体细胞核移植 陈永福(2001年9月):获得1头体细胞克隆牛 董雅娟、柏学进等(2001年):获得2头健康体细胞克隆牛;陈大元等2002年2月克隆成活5头体细胞克隆牛 胚胎干细胞 窦忠英等(1995)首先分离克隆出牛类胚胎干细胞 窦忠英等(1999)
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