实验室设备和一般技术.pptVIP

1玻璃器材的清洗 主要包括培养瓶、试管、培养皿、移液管的清洗 新玻璃器材的清洗： 浸泡－－刷洗－－浸酸－－冲洗－－蒸馏水冲洗 使用过的玻璃器材的清洗 浸泡－－刷洗 注意：1.量器不可刷洗 2.有毒物容器处理 2橡胶制品的清洗 新橡胶制品清洗： 碱煮沸－－冲洗－－酸煮沸－－冲洗－－自来水煮沸－－蒸馏水冲洗－－烘干 使用过的胶塞按照玻璃器材方法清洗 3除菌滤器的清洗 新的G6除菌滤器的清洗 清洁液中浸泡24h－－流水冲洗至pH5.5－－4倍体积蒸馏水缓慢冲洗－－三蒸水冲洗－－烤干－－包装消毒 用过的G6除菌滤器的清洗 立即浸泡水中过夜－－流水冲洗24h－－滤面基本疏通时50℃烤干－－清洁液中浸泡24h－－流水冲洗至pH5.5－－4倍体积蒸馏水缓慢冲洗－－三蒸水冲洗－－烤干－－包装消毒 蔡式滤器清洗 4塑料器皿的清洗 注意：防止划痕，防止附着物干结 过程：脱脂棉擦拭－－流水冲洗－－晾干－－2%NaOH浸泡过夜－－自来水冲洗－－5%盐酸浸泡30min－－自来水冲洗－－蒸馏水冲洗 5金属器械的清洗 金属用品一般不宜用各种洗涤液洗涤（新的可以用热洗衣粉水洗净），需要清洗时，一般用酒精擦洗，然后火焰干燥。 6常用洗涤液的种类和配制方法 铬酸洗液 浓盐酸 5%草酸溶液 5％-10%EDTA－Na2溶液 尿素洗涤液 有机溶剂 本章思考题 细胞工程实验室由哪些房间组成，基本布局怎样？ 设计无菌操作室应考虑哪些因素？ 细胞工程常用的设备有哪些？ 新买玻璃器皿应怎样洗涤？ 橡胶制品应怎样清洗？ 第一章 实验室设备和一般技术 实验室是细胞工程研究的主要场所，应能满足清洗、培养基制备、储藏、无菌操作、培养、鉴定等多方面的工作需要。 第一节 实验室设计 洗涤间 培养基配制间 消毒间 无菌操作间 培养室 鉴定室 洗涤间 面积:30-50m2 配置：在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽，用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2个水槽，用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大，可以购置一台洗瓶机。准备1-2个洗液缸，专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等，地面应耐湿并排水良好。 超声波清洗机 全自动洗瓶机 培养基配制间 面积60平方米左右 配备的主要仪器设备有 ：冰箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。 冰箱以体积180-200L为宜(最好冷藏容积大于冷冻容积），用于储存培养基母液、激素维生素等贵重药品、彩色胶卷、及保存植物材料。 天平应有不同感量。 消毒间 配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅，较大的实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。 如果没有条件的话，可以将上述工作间合并成一个准备间，要求是设备的安装和排列要合理、房间要宽敞、明亮、透风，地面要便于清洁、防滑。 无菌操作室（接种室） 通常由里外两间组成，外间是缓冲间，用于准备工作，还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开，两个门也不要同时开启，以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修，工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。 室内应配有超净工作台，紫外灯、解剖镜、各种接种器械等。 培养室 为了控制培养室的温度和光照时间及其强度，培养室的房间不要窗户，但应当留一个通气窗，并安上排气扇。室内温度由空调控制，光照由日光灯控制。天花板和内墙最好用塑料钢板装修，地面用水磨石或瓷砖铺设，一般要分两间，一为光照培养室，一为暗培养室。培养室外应有一预备间或走廊。 培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W，固定在培养架的侧面或搁板的下面，每层有两支日光灯，距离在20cm，光照强度为2000-3000lx。 辅助实验室 鉴定室 温室 鉴定室 细胞学鉴定室 其功能是对培养材料进行细胞学鉴定和研究。要求清洁、明亮、干燥，使各种光学仪器不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系统等。 生化分析室 在以培养细胞产物为主要目的的实验室中，应建立相应的分析化验实验室，以便于对培养物的有效成分随时进行取样检查。 离心机、酶联免疫检测仪、天平、PCR仪等。 温室 为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。 第二节 常用设备和器材 准备室装置：水纯化装置 超声波清洗器 蒸汽压力消毒器 电热干燥箱 过滤除菌装