甾体类化合物含甾体皂苷和强心苷.pptVIP

方法：用稀酸(0.02～0.05mol/L的盐酸或硫酸)在含水醇中经短时间(半小时至数小时)加热回流，可使强心苷水解成苷元和糖。 ②强烈的酸水解 对于不含2-去氧糖的强心苷在稀酸条件下水解较为困难。较剧烈的条件：3％～5％HCl, 增加作用时间或同时加热，才能使其水解。 上述条件引起苷元发生脱水反应，得不到原来的苷元。其中，C-14羟基和5β-羟基均系叔羟基，最易发生脱水反应，C-16羟基也可与C-17氢脱水。 ③酶水解 含强心苷的植物中：有选择性水解β-D-葡萄糖苷键的酶共存，没有可以水解2-去氧糖苷键的酶。 与强心苷共存的酶只能使末位的葡萄糖脱离，而不能水解2-去氧糖，从而去除分子中的葡萄糖而保留2-去氧糖。 酶的水解能力：乙型强心苷较甲型强心苷更易被酶水解；一般糖基比乙酰化糖基水解速度快。 由于酶解法具有条件温和，选择性好，产率高等特点，在强心苷生成中有很重要的作用。 应用：利用酶解法使植物体内的原生苷水解成强心作用更强的次生苷。因为强心苷的强心作用与分子中糖基数目有关，即苷的强心作用强度为：单糖苷二糖苷三糖苷。 ④碱水解 强心苷的结构中，除了苷元上具有不饱和的内酯环，在苷元以及所连接的糖基上常有乙酰取代。碱试剂可使强心苷分子中的酰基水解、内酯环开裂、△20(22)转位及苷元异构化等。同样的,可以进行温和的和剧烈的碱水解。 温和的碱水解：试剂有碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钙和氢氧化钡。可选择性地水解酰基而不影响内酯环。 剧烈的碱水解：试剂有氢氧化钠、氢氧化钾。 在水溶液中，氢氧化钠、氢氧化钾能使强心苷的内酯环开裂，酸化后又可重新闭环。在醇溶液中，氢氧化钠、氢氧化钾也能使内酯环开裂，但同时还使其结构异构化，故酸化也不再有可逆变化。 碳酸氢钠或碳酸氢钾主要使2-氧糖上的酰基水解，而2-羟基糖及苷元的酰基往往不被其水解；氢氧化钙或氢氧化钡可以使2-去氧糖、2-羟基糖及苷元上的2-羟基糖及苷元酰基水解。 (3)显色反应 强心苷除了一般苷类的显色反应外，由于强心苷分子中有甾体母核、不饱和内酯环和α-去氧糖等结构部分，可与一些化学试剂发生反应而显特定的颜色。 ①甾体母核的显色反应 无水条件下，强心苷经强酸(如硫酸、盐酸)、中强酸(如磷酸、三氯乙酸)、路易斯酸(如三氯化锑)的作用，甾体母核脱水形成双键，由于双键移位、缩合等形成较长的共轭系统，并在浓酸溶液中形成多烯正碳离子的盐而呈现一系列的颜色变化。 a．乙酐-浓硫酸反应：强心苷溶于氯仿，加冷乙酐-浓硫酸(3：2)混合液数滴，反应液呈黄-红-蓝-紫-绿的颜色变化，最后褪色。本反应的颜色变化过程随分子中羟基、双键的数目与位置不同而异，羟基多、有不饱和双键的作用较快。 b．Salkowski反应：强心苷溶于氯仿，沿管壁缓缓加入浓硫酸静置，氯仿层呈血红色或青色，硫酸层有绿色荧光。 c．三氯化锑反应 d．Tschugaev反应 e．磷酸反应 f．三氯醋酸一氯胺T反应 ②α,β-不饱和内酯环的显色反应 甲型强心苷在碱性醇溶液中，双键由20(22)转移到20(21)，生成C-22活性亚甲基；乙型强心苷在碱性醇溶液中不能产生活性亚甲基。故能用活性亚甲基试剂显色作用区别甲型和乙型强心苷。 常用活性亚甲基试剂： b．间二硝基苯试剂 c．3,5-二硝基苯酸甲试剂d．碱性苦味酸试剂 a．亚硝酰铁氰化钠试剂：取样品1~2mg，溶于2~3滴吡啶中，加1滴3％亚硝酰铁氰化钠溶液和1滴2mol／L的氢氧化钠溶液，反应液呈深红色并逐渐褪去。 ③ α-去氧糖的显色反应 a．Keller-Kiliani(k k)反应：取样品lmg溶于5mL冰醋酸中，加l滴20％三氯化铁水溶液，倾斜试管，沿管壁徐徐加入5mL浓硫酸，观察界面和乙酸层的颜色变化。如有α-去氧糖存在，乙酸层渐呈蓝色。界面的颜色随苷元羟基、双键位置和数目不同而异。 b．过碘酸-对硝基苯胺反应：本试剂对强心苷分子中的α-去氧糖反应机理是：过碘酸能使强心苷分子中的α-去氧糖氧化生成丙二醛，丙二醛与对硝基苯胺试液反应呈深黄色。 3.强心苷的提取分离 提取分离单体强心苷的难度：成分复杂；含量较低；发生水解、脱水及异构等反应。 强心苷有亲脂性苷、弱亲脂性苷或水溶性苷： 70％～80％的乙醇为提取溶剂，析胶浓缩后用氯仿和氯仿-乙醇溶液依次萃取，将强心苷按极性大小划分成几个部分。 各个部分中如有含量较高的组分，可用适当的溶剂结晶，再进一步用适当的溶剂提取后使之结晶或纯化，但一般还需要用各种色谱方法分离。 常用的色谱方法有硅胶、反相硅胶和氧化铝吸附色谱及各种分配色谱等。硅胶和氧化铝吸附色谱一般可