血液分析仪检验_临床检验基础.pptVIP

血液分析仪及其临床应用 hematology analyzer and clinical application 重点 : 1、血液分析仪测定的原理、方法 2、血液分析仪各参数临床意义 血液分析仪 自动血液分析仪（automated hematology analyzer, AHA)，早年称血细胞计数仪（blood cell counter)是目前国内外临床检验最常用的筛检仪器之一。 Coulter 1947年发明了利用电感应区检测颗粒大小和数目的库尔特原理 1953年，制造出世界上第一台颗粒粒度分析仪，成为颗粒计数经典方法 1958年，库尔特公司成立 创办库尔特基金，热心社会公益事业。 库尔特与李俊的差别:社会价值观的差别 血细胞分析仪近年来的发展变化 1. 血常规检验多参数化 2. 多功能合成扩展 3. 检测速度的提高 4. 方法的改进和进展 5. 应用的方便性 一 血液分析仪检测原理 血液分析仪功能： ①全血细胞计数功能。 ②白细胞分类功能。 ③扩展功能。 2 库尔特原理图 （一） 电阻抗法原理（库尔特原理） 1 库尔特原理 利用电阻抗法测量细胞的数量和体积。 血细胞是电的不良导体，当一个细胞通过计数小孔时，会导致小孔两端电阻的变化，将其转化成脉冲，感应器通过检测脉冲的数量及大小，从而计算出通过小孔的细胞数量及体积。 细胞体积越大，脉冲振幅越高；细胞数量越多，脉冲数量也越多。 3 电阻抗法仪器的主要组成 电阻抗法仪器的主要组成包括： ① 信号接收器 各种微粒通过检测小孔产生电阻抗脉冲信号的检测源。 ②放大器 将血细胞微弱脉冲信号放大以触发电路系统。 ③阈值调节器 调节能区分不同群细胞合适的信号电平。 ④甄别器 去除非参考电平的各种假信号以提高计数的准确性。 ⑤整形器 将不一致的脉冲波形信号调整为标准的波形后触发计数电路系统。 ⑥计数系统 将整形后的血细胞脉冲信号显示为不同类群的细胞数。 二、激光散射法 激光散射法应用了流式细胞术(flow cytometry, FCM) 检测原理。 流式细胞术检测原理：细胞通过激光束被照射时，产生与细胞特征相应的各种角度的散射光。对经信号检测器接收的散射光信息进行综合分析，即可准确区分正常类型的细胞。 低角度散射光（前向散射光）：反映细胞的数量和表面体积大小。 高角度散射光（侧向散射光）：反映细胞的内部颗粒、细胞核等复杂性。 激光散射法在区别体积相同而类型不同的细胞特征时，比电阻抗法分群更加准确。故激光散射法已成为现代五分类血液分析仪的主要检测原理之一。 流式细胞仪的技术特点 流式细胞仪在设计上采用了许多独特的技术，比如液流系统、光路系统、信号测量和细胞分选方面都有自己的技术特点。 鞘流原理 雷诺系数 Re Re＝d ρν/η d: 管子的直径 ρ：液体的密度 ν：液体的流速 η：液体的粘滞系数 Re2300， 液流处于稳流状态 Re2300， 液流处于湍流状态 通常把标本流的流速控制在10m/s以内，就能保持标本流处于稳流状态。 外面包被有高速流动的鞘液，实现标本与鞘液稳定的同轴流动状态。 同时利用液流聚焦原理，使标本流直径变小，通常只有10～20μm，避免细胞多个重叠进入检测区。 激光散射法系统基本组成 1、光源 气体（氦－氖）激光或固体（半导体）激光（单色光）；钨光源（多色光）。 2、鞘流 维持颗粒于液流中央，顺序、单个、恒速向前流动，即流体动力学聚焦。 3、细胞悬液 被检测细胞（颗粒）的悬液，由气压导入流动池。 4、光检测器 接受来自各种角度的散射光或吸收光信号，并转换成相应特征的电信号 三、射频电导法 射频（radio frequency, RF) 指射频电流，是每秒变化大于10 000次的高频交流电磁波。高频电流能通过细胞壁。 用高频电磁探针渗入细胞膜脂质可测定细胞的导电性，提供细胞内部化学成分、细胞核和细胞质、颗粒成分等特征信息。 四、分光光度法 分析仪检测Hb 的原理： 被稀释的血液加入溶血剂后，红细胞溶解，释放血红蛋白，后者与溶血剂结合形成Hb衍生物，在特定波长（530～550nm）下比色，吸光度的变化与液体中Hb含量成比例。 血液分析仪检测参数原理 一、白细胞系列参数检测原理 根据电阻抗的原理，不同体积白细胞(35-450)fL产生脉冲大小的明显差异而区分相应的三群细胞： （一）电阻抗法 仪器将体积为35～450fL的血细胞，分为256个通道（channel）。每个通道：1.64fl。根据细胞大小，分别置于不同的通道中，显示血细胞体积分布直方图(Histogram)。 1.分群 经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生了变化！！！ 白细胞通透性