课题3　分解纤维素的微生物的分离 (3).pptxVIP

;;一、纤维素分解菌的筛选;;;(2)纤维素酶 ①组成：是一种复合酶，至少包括三种酶，即C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶。;(2)原理 纤维素＋刚果红→红色复合物 ↓纤维素酶 纤维二糖和葡萄糖，不能和刚果红形成红色复合物 ↓ 以 为中心的透明圈 ;;答案　筛选目的菌株应该到有利于目的菌株生长的环境中寻找。;答案　液体培养基，因为配方中无凝固剂。液体培养基与微生物的接触更密切，微生物更容易从培养基中获得营养物质，因此可以快速增加微生物的浓度。;归纳总结　;;答案　能。纤维素分解菌分解纤维素只是为了利用纤维素作为碳源，其他有机物若可提供碳源，也可以生存。;2.分析右表培养基的配方，请回答下面的问题。 纤维素分解菌的选择培养基： 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。 (1)此培养基配方中为微生物提供碳源的主要是 、氮源是 。 (2)此配方为 培养基(根据物理状态)配方。 (3)此培养基选择出的微生物主要是__________ 。;问题导析　(1)该培养基中 是主要的碳源，所以可以用于筛选_____ 。 (2)由于该培养基中没有加入 ，所以为液体培养基。液体培养基中微生物与营养成分的接触更充分，可以提高微生物的代谢效率。;返回上页;答案　当土壤中纤维素分解菌的浓度很高时，可以省略选择培养这一步骤。;;;2.实验操作注意事项 (1)土壤取样时要选择富含 的环境。 (2)选择培养的方法：用富含 的选择培养基。 目的：增加 的浓度。 (3)梯度稀释的目的：能获得单个菌落。 (4)涂布平板时要选择 纤维素分解菌的培养基。 (5)挑选产生 的菌落。;3.菌种的进一步鉴定 (1)鉴定原理：为确定透明圈内的菌落是纤维素分解菌，需要进行发酵产_________的实验。 (2)发酵方法：有 发酵和 发酵两种。 (3)纤维素酶的测定方法：一般是对纤维素酶分解 等纤维素后所产生的 进行定量的测定。;;答案　①鉴别培养基是在培养基中加入某些特定的作用底物和指示剂，观察微生物生长过程中分解底物所释放的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别微生物；选择培养基是在培养基中加入某些物质，以促进目的菌的生长繁殖，同时抑制其他杂菌的生长繁殖。 ②选择培养的培养基中没有加入琼脂，所以属于液体培养基，而鉴别培养基一般为固体培养基。;答案　方法一更容易区分纤维素分解菌和其他杂菌。即先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，所显示的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二中有些微生物具有降解色素的能力，它们在生长过程中会降解刚果红，也会使培养基上形成透明圈，与纤维素分解菌不易区分。;答案　产生透明圈的菌落可能是能产生纤维素酶的微生物，也可能是能降解刚果红的菌种，所以需要进一步鉴定。;归纳总结　;;4.研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物，请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题： (1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和 酶。;(3)刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与 和 发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在 时就加入刚果红。;(4)如果观察到产生 的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行 的实验。纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的 进行定量的测定。;;课堂小结;;2;2;3.在分解纤维素的微生物的分离实验中，为了判断选择培养基是否起到了对纤维素分解菌的选择作用，需要设置的对照是 A.未接种的只有纤维素为唯一碳源的培养基 B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D.接种了的只有纤维素为唯一碳源的培养基;4.通过分离分解纤维素的微生物实验，对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选，这只是分离提纯的第一步，还需要进行 A.发酵产纤维素酶的实验 B.提取纤维二糖的实验 C.浓缩纤维