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- 2019-11-10 发布于河南
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专题5 课题3(第1课时)岷县第一中学生物教研组 何小彪§5.3血红蛋白的提取和分离课题背景蛋白质是生命活动的主要承担者,也是生命活动不可缺少的物质。2003年4月14日人类基因组序列图宣布完成,标志着人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。对蛋白质的研究与应用,首先需要获得纯度较高的蛋白质。因此,从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是生物科学研究中经常要做的工作。一、基础知识蛋白质分离的原理: 根据蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等,可以用来分离不同种类的蛋白质。(一) 凝胶色谱法(分配色谱法)1.概念:根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的大小,利用具有网状结构的凝胶,来进行分离。2.凝胶:大多数凝胶是由多糖类化合物(如葡聚糖或琼脂糖)构成的多孔小球体,内部有许多贯穿的通道。3.凝胶色谱法分离蛋白质的具体过程:(1)演示:(2)原理:当不同的蛋白质通过凝胶时相对分子质量较大相对分子质量较小无法进入凝胶内部的通道容易进入凝胶内部的通道只能在凝胶外部移动路程较长移动速度较慢路程较短移动速度较快相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。(3)小结:不同的蛋白质相对分子质量大小直径大小运动路径运动速度运动路程洗脱次序大于凝胶颗粒孔道直径小于凝胶颗粒孔道直径被阻挡在凝胶颗粒外面而迅速通过因扩散进入凝胶颗粒内部而被滞留较快较
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