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基因工程专题复习;马铃薯;马铃薯易被致病疫霉(一种真菌)感染而患晚疫病,危害马铃薯的叶、茎、果实,使马铃薯减产严重。;转基因育种;如何培育转基因马铃薯?;转基因植株
检测与鉴定;获取目的基因; 【例1】已知类甜蛋白基因(TLP)序列,以非洲甜菊的基因组DNA为模板,设计上下游引物,采用_____ 扩增得到目的基因,对所得目的片段进行回收,-20℃保存。;获取目的基因的方法有哪些?; 获取目的基因; 【例2】获得类甜蛋白基因(TLP)后,将其与根癌农杆菌的Ti质粒连接在一起。通常是用相同的 分别切割目的基因和Ti质粒,这样会在目的基因和Ti质粒的两端形成相同的 ,然后用 将目的基因和Ti质粒连接在一起,形成重组DNA分子。;BamHⅠ;Ti质粒;解决办法?;BamHⅠ;BamHⅠ; 获取目的基因;; 获取目的基因;【例4】以马铃薯薄片为外植体,利用植物组织培养技术得到转基因再生植株:将与菌液充分接触的马铃薯薄片取出,用滤纸吸去表面菌液,接种到含适当配比 _____________的MS固体培养基上,经_____过程得到愈伤组织,转接到含____的MS培养基中进行筛选,再依次转接到___培养基和___培养基中,得到马铃薯再生植株。; 获取目的基因;;分子水平检测:;【变式训练】 回答与基因工程和植物克隆有关的问题。
(1)将含某抗虫基因的载体和含卡那霉素抗性基因的载体pBI121均用限制性核酸内切酶EcoR I酶切,在切口处形成____________。选取含抗虫基因的DNA片段与切割后的pBI121用DNA连接酶连接。在两个片段相邻处形成____________ ,获得重组质粒。
(2)已知用CaCl2处理细菌,会改变其某些生理状态。取CaCI2处理过的农杆菌与重组质粒在离心管内进行混合等操作,使重组质粒进入农杆菌,完成____________实验。在离心管中加入液体培养基,置于摇床慢速培养一段时间,其目的是_____________________________,从而表达卡那霉素抗性基因,并大量增殖。
(3)取田间水稻的幼胚,先进行_________,然后接种到培养基中培养,幼胚发生__________形成愈伤组织。用含重组质粒的农杆菌侵染愈伤组织,再培养愈伤组织,以便获得抗虫的???基因水稻。鉴定转基因是否成功,可用____________________________,检测水稻是否抗虫。;谢谢!
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