GB/T 13089-1991饲料中恶唑烷硫酮的测定方法.pdf

中华人民共和国国家标准 饲料中嗯哇烷硫酮的测定方法 GB 13089一91 Method for determination of o-sanlidinethione in feeds 本标准参照采用国际标准ISO 5504-1983《含油种子及其去油后饼粕中异硫氛酸醋和嗯哩烷硫酮 的测定》。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了饲料中嗯哇烷硫酮的测定方法。 本标准适用于菜子饼粕和配合饲料中il哇烷硫酮的测定。 2 原理 饲料中的硫葡萄糖昔被硫葡萄搪昔酶(芥子酶EC 3. 2. 3. 1)水解，再用乙醚萃取生成的嗯哇烷硫 酮，用紫外分光光度计测定。 3试荆和溶液 除特殊规定外，本标准所用试剂均为分析纯，水为燕馏水或相应纯度的水。 3.1乙醚:光谱纯或分析纯。 3.2去泡剂:正辛醇(C.HOH), 3.3 pH7.0缓冲液:取35.3 mL 0. 1 mol/L柠檬酸(C5H807-H,O,HG 3-1108)溶液(21. 01 g/L)于一 个200 ml, 容量瓶中，再用0. 2 mol/L磷酸氢二钠(GB 1263)溶液调节pH至7.0. 3.4酶源:用白芥(Sinapis alba L.)种子(72 h内发芽率必须大于85%，保存期不得超过两年)制备。将 白芥籽磨细，使80%通过0. 28 mm孔径筛子，用正己烷或石油醚(沸程40-60C)提取其中脂肪，使残油 不大于2%,操作温度保持30℃以下，放通风橱于室温下使溶剂挥发。此酶源置具塞玻璃瓶中4℃下保存， 可用6周。 4 仪器、设备 4.1 分析天平:感量0. 000 1 g, 4.2 样品筛:孔径。.28 mm. 4.3 样品磨。 4.4 玻璃干燥器。 4.5 恒温干燥箱:103士20c, 4.6 三角烧瓶:25,100,250 mL, 4.7 容量瓶:25,100 mL. 4.8 烧杯:50 ml。 4.9 分液漏斗:50 mLo 国家技术监督局1991一07一16批准 1992一04一01实施 免费标准下载网() 无需注册 即可下载 GB 13089一91 4门0移液管:2 mL. 4.11振荡器:振荡频率10。次/min(往复) 4.12分光光度汁:有10 mm石英比色池， 可在200^300 nm处测量吸光度。 5试样制备 采集具有代表性的样品至少500 g，四分法缩分至50 g，再磨细，使其80%能通过。.28 mm筛。 6 测定步骤 6.1称取试样(菜籽饼粕1. 1 g，配合饲料5. 5 g)于事先干燥称重(精确到。. 001 g)的烧杯中，放入恒温 干燥箱((4-5)，在103 f2℃下烘烤至少8h，取出置干燥器((4-4)中冷至室温，再称重，精确到。.001 go 6.2试样的酶解 将干燥称重的试样全倒入一250 mL三角烧瓶(4-6)中，加入70 mL沸缓冲液((3-3)，并用少许冲洗 烧杯，使冷却至30C，然后加入。.5g酶源(3-4)和几滴去泡剂((3-2)，于室温下振荡2h。立即将内容物定 量转移至100 ml_容量瓶(4.7)中，用水洗涤三角烧瓶(4.6)，并稀释至刻度，过滤至100 mL三角烧瓶 (4-6)中，滤液备用