食品安全管理及微生物知识.ppt

4 混合指示剂（mixed indicator） →一类同时使用两种指示剂，利用彼此颜色之间的互补作用，使变色更加敏锐。如溴甲酚绿和甲基红。 →另一类由指示剂与惰性染料（如亚甲基蓝，靛蓝二磺酸钠）组成的，也是利用颜色的互补作用来提高变色的敏锐度。 →需要将滴定终点限制在很窄的pH范围内，可采用混合指示剂。 →非混合指示剂，终点颜色变化约有±0.3pH的不确定度。用混合指示剂，有±0.2pH的不确定度。 1、平板计数琼脂(PCA) 胰蛋白胨 5.0g －－－提供氮源和氨基酸 酵母粉 2.5g －－－提供B族维生素和一些促进因子 葡萄糖 1.0g －－－提供碳源 琼脂 8~15g －－－凝固剂 PH值6.8-7.2(25℃) 这些营养可供一般细菌的生长。 2、LST 胰酪蛋白胨 20g －－大肠菌群生长发育所需的氮源、维生素和氨基酸 　氯化钠　　5.0g －－维持渗透压 　　乳糖　 　5.0g －－碳源 磷酸氢二钾(K2HPO4)　2.75g  磷酸二氢钾(KH2PO4)　2.75g －－ 维持缓冲体系 　　月桂基硫酸钠　　　　0.1g －－ 抑制非大肠菌群的生长 　蒸馏水　　　　　　1000.0mL 最终pH6.8±0.2 (25℃)  大肠菌群和大肠杆菌在LST上发酵乳糖产酸产气。 3、煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤 成分：　　蛋白胨 10.0g　　乳糖　　　　 10.0g　　牛胆粉 20g　　0.1％煌绿水溶液 13.3mL　　蒸馏水制备： 用途：用于大肠杆菌的最近似数（MPN）测定。可检测水、乳类及其他食品。 质控： 配成的培养基应呈淡绿色透明液体。 说明： 此培养基是Windle和Taylor推荐Mackenzie的方法，是将假定阳性的麦康凯肉汤或十二烷基硫酸盐胰蛋白眎肉汤管的内容物，接种于此培养基中，作为大肠菌群确认试验。此培养基是美国公共卫生协会编的《水和废水检验方法》（1980，第15版）和《乳品检验标准方法》（1978，第14版）推荐的方法。煌绿和牛胆盐能抑止革兰氏阳性细菌的生长。 4、EC肉汤 胰酪蛋白胨 20.0g　　3号胆盐 　　　　 1.5g 　　乳糖　　　　　　　　　　　 5.0g　　磷酸氢二钾(K2HPO4)　　　　4.0g 　　磷酸二氢钾(KH2PO4)　　　　 1.5g　　氯化钠　　　　　　　　　　5.0g 　　蒸馏水　　　　　　　　 1000.0mL 　　最终pH6.9±0.1 (25℃)  胰酪蛋白胨提供大肠菌群生长发育所需的氮源、维生素和氨基酸，乳糖提供发酵所需的碳源，氯化钠维持渗透压，磷酸盐维持缓冲体系，3号胆盐抑制革兰氏阳性菌的生长和肠球菌的生长。大肠菌群和大肠杆菌在EC上发酵乳糖产酸产气。 5、EMB 蛋白胨　　　　　　 10.0g 　　乳糖 　　　　　　　10.0g 　　磷酸氢二钾 2.0g 　　琼脂　　　　　　　 15.0g　　伊红γ 0.4g　　美蓝　　　　　　　0.065g 　　蒸馏水　　　　　 1000.0mL　　最终pH7.1±0.2 (25℃) 蛋白胨提供细菌生长发育所需的氮源、维生素和氨基酸，乳糖提供发酵所需的碳源，磷酸氢二钾维持缓冲体系，伊红Y和美蓝抑制绝大部分革兰氏阳性菌的生长。琼脂是凝固剂。 大肠杆菌在EMB上发酵乳糖，形成黑色菌落，大部分有金属光泽。沙门氏菌形成无色菌落。金黄色葡萄球菌基本上不生长。 质控： 此培养基呈紫色，可有细微沉淀。质控菌株接种后，35℃培养18～24小时，观察结果应如下表所示： 菌株 菌号 生长情况 菌落 产气肠杆菌 ATCC 13048 好 粉红，无光泽 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 好，极好 有紫绿金属光泽中心 肺炎克