植物的离体快繁.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 提高小苗移栽成活率的方法 1、将小苗进行分级。 2、要进行炼苗。 3、选好定植场所。 4、要严格掌握移栽技术，科学确定合适的移栽时间。 5、重视移栽后的管理。 四、植物离体快繁的常见问题 1、污染 2、遗传稳定性 3、玻璃化现象 4、褐变的发生 1、污染 细菌污染 真菌污染 污染 细菌污染的特点 在培养材料附近出现黏液状菌斑，一般接种1-2天一5可发现。 真菌污染的特点 培养基上长霉，一般接种3-5天就可见，霉的颜色有黑、白、黄等。 细菌污染 表现： 发酵状 水渍状 滴形云雾状 污染原因： 培养基灭菌不过关 接种器具污染 操作污染 交叉污染 真菌污染 表现： 灰、白、黄、绿菌丝体、孢子组成绒毛状物有色圈 污染原因： 培养室湿度过大 瓶口积落有灰尘和孢子。 材料内部带菌 在培养基中表现的症状 外植体接触培养基部位长菌 外植体损伤部位长菌 外植体生长不良或表现出缺绿 防治措施 接种前的工作： 1、 接种室的灭菌 2、超净工作台的灭菌 3、 接种器皿、用具的灭菌 4、工作人员接种前应做的准备工作 5、 材料的灭菌 1、接种室的灭菌 接种室的地面，墙壁要擦洗干净 接种前一夜用甲醛熏蒸10ml/m2 接种室还可以采用紫外灯灭菌 2.超净工作台的灭菌 开风机前将紫外灯打开30分钟以上 之后开风机15分钟 用95%酒精洗工作台面 3.接种器皿、用具的灭菌 用具先用95%酒精浸泡，后于酒精灯外焰灼烧 4.工作人员接种前应做的准备工作 个人卫生，穿工作服 用75%酒精擦手 5.材料处理灭菌 材料的预处理 (剪切、清洗) 75%酒精 (20 s) 0.1%升汞 (15 min) 无菌水冲洗 （6次） 沥干 接种 接种时的工作 1、防止空气污染 2、防止操作带来的污染 3、防止器皿用具污染 防止空气污染 接种时在近火焰处打开瓶口，使瓶倾斜，以免空气中微生物落入瓶中 正 确 错 误 接种过程中尽可能达到悬空要求 防止操作带来的污染 正 确 错 误 瓶盖朝上放，接种完毕后立即盖好瓶口 防止操作带来的污染 正 确 错 误 2、遗传稳定性 影响遗传稳定性的因素有： 1、基因型 2、继代次数 3、发生方式 4、激素浓度 提高遗传稳定性的措施 1、在进行植物离体快繁时，应尽量采用不易发生体细胞变异的增植途径，以减少或避免植物个体或细胞发生变异。 2、取幼龄的外植体材料，缩短继代时间，限制继代次数。 3、采用适当的生长调节物质种类和较低的浓度。 4、定期检测，及时剔除生理、形态异常苗。 影响玻璃化苗发生的因素 1.培养材料：材料种类和外植体不同都有影响。 2.环境因素：液体培养比固体培养更易玻璃化；蔗糖浓度与玻璃化呈负相关；通气不良；温度过高等都可导致玻璃化。 3.培养基成分：铵离子过多可致玻璃化；6-BA浓度与玻璃化呈正相关等。 控制玻璃化苗的措施 1.采用固体培养，提高蔗糖含量 2.通气，适当提高光强，控制温度 3.降低培养基中NH4+和细胞分裂素浓度 4、褐变现象 概念 褐变：指在组织培养过程中，由培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。 褐变原因 由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，将酚类化合物氧化成醌类物质，会抑制其它酶的活性，从而影响所接种外植体的培养。 减轻褐变现象发生的方法： 三个选择： 分生能力强的外植体 合适的无机盐成分浓度、合适的蔗糖浓度和激素 适宜的温度 两个加入： 活性碳、抗氧化剂 一个连续 ： 连续将材料进行转移 请老师同学指正补充 谢谢！ * * * * * * * * * * * * 植物的离体快繁及脱毒技术 制作人：崔伟康 学号：103131205 目录 一、植物快速繁殖技术 二、植物快繁的器官形成方式 三、快速繁殖的基本程序 四、植物离体快繁的常见问题 一、植物快速繁殖技术 概念 快速繁殖：将外植体在人工培养基和合适的条件下进行培