生物技术细胞工程.ppt

* * * * * * * 海藻酸钠、明矾可以作为包埋剂及包埋 * * * * * * * * * * * * 最早是机械分离细胞壁的方法，先将细胞放在高渗溶液中，引起细胞脱水，细胞质收缩，质壁分离，然后用组织捣碎机等高速运转的刀具随即切割细胞壁，获得。但是活性低。 * * 原则上外植体可以是任何部位，但是一般选择分生能力比较强的，这样的生活力比较强，再生与分生比例较高 * * * * * * * * * * * * * 生长互补法。。。如A缺K不长，B缺P不长，那么在既缺K又缺P的培养基上。。只有A、B的杂合细胞才能生长 * * * 孤雌生殖、孤雄生殖、无融合生殖！ * * 预处理有利于愈伤组织的形成！！ * * * * * * 初代培养 旨在获得无菌材料和无性繁殖系。即接种某些外植体后，最初的几代培养。初代培养时，常用诱导或分化培养基，即培养基中含有较多的细胞分裂素和少量的生长素。初代培养建立的无性繁殖系包括：茎梢、芽丛、胚状体和原球茎等。 * * * 维生素B6对根的生长有促进作用 维生素B1与愈伤组织的产生和生活力有密切关系 * 维生素B6对根的生长有促进作用 维生素B1与愈伤组织的产生和生活力有密切关系 * * * * * * * * 通常采取的措施有：对外界要增加湿度、减弱光照；对试管内要通透气体、增施二氧化碳肥料、逐步降低空气湿度等。  * 试管苗由于是在无菌、有营养供给、适宜光照和温度近100%的相对湿度环境条件下生长的，因此，在生理、形态等方面都与自然条件生长的小苗有着很大的差异。所以必须通过炼苗，例如通过控水、减肥、增光、降温等措施，使她们逐渐地适应外界环境，从而使生理、形态、组织上发生相应的变化，使之更适合于自然环境，只有这样才能保证试管苗顺利移栽成功。 * * 植物中有很多都带有病毒，严重影响植物的产量和品质，给农业带来灾害。特别是无性繁殖植物，如马铃薯、草莓、大蒜、康乃馨等，由于病毒是通过维管束传导的，因此利用这些植物营养器官繁殖，就会把病毒带到新的植物个体上而发生病害。但是也证明感病植株并不是每个部位都带有病毒，如茎尖生长点尚未分化成维管束的部分，可能不带病毒。若利用组织培养法进行茎尖培养，再生的植株有可能不带病毒，从而获得脱病毒的苗，再用这种苗进行繁殖，则种植的植物就不会或极少发生病毒病。  * * * * * * * * * * * * 应用干细胞治疗疾病的优点： 低毒性(无毒性)，一次性治疗有效 不需要完全了解疾病发病的确切机制 用自身干细胞移植，可避免产生免疫排斥反应。（2012年诺贝尔奖获得者-细胞核重新编码） * * * * * * * * * * * * * * * Blastula 囊胚 * * * * * * * * * 童第周先把金鱼卵的细胞核挖掉，然后，移入鲫鱼的细胞核。于是，便长出了那种“怪鱼”。“怪鱼”既具有金鱼的特征，又具有鲫鱼的特征，这说明细胞质和细胞核对遗传都起作用。 * * * * * * 原西德、美国和日本等国的专家，将番茄的叶肉细胞与马铃薯的块茎细胞相融合．选育成功“番茄薯”和“薯番茄”新品种，其中所育成的“番茄薯”新品种地上部分能结番茄，地下部分能结马铃薯。 * 大多数动物细胞具有贴壁生长的特性，其大规模培养方法有： 微导管培养法 微载体培养法 葡聚糖聚合物 微胶囊培养法 褐藻酸钠 细胞培养法 组织培养法 将小白鼠断颈处死，然后用75%酒精或1‰ 新洁尔灭浸泡消毒，迅速进入无菌室。 将小白鼠置超净工作台上，打开腹腔 用眼科剪和镊，将肾外膜剪破，并将其剥向肾门，去肾外膜及脂肪， 剪碎组织 接种组织块 移入培养箱中（注意贴有组织块的一面朝上）， 静止2～3小时，然后将细胞培养瓶轻轻翻转，继续静止培养。 24～48小时后若培养液变成黄色且混浊，表示已被污染； 若培养液变成紫色，一般细胞生长不好，则培养液pH过高； 若培养液显为橙黄、橘红且清澈，一般显示细胞生长良好。在相差显微镜下观察，若此时见细胞自组织边缘长出。 继续培养3～5日，再换部分或全部培养液，待多数组织块的生长晕相接，小心挑掉组织块，继续培养3～4天，细胞贴满细胞培养瓶壁时便可进行传代培养。 观 察 培养物的传代 悬浮培养的细胞：定期将其转移到新鲜培养基中 组织培养物：需剥离组织 经典传代法 冷冻保存(液氮) 5%-10%的二甲亚砜(DMSO) 10%玻璃化保护剂(PVS2) 培养物的长期保存 2、动物细胞融合 用自然或人工的方法使两个或几个不同细胞融合为一个细胞（含有原来2个细胞的染色体）的过程。 亲缘较远的生物体之间是无法正常杂交的，但他们之间的体细胞却往往能彼此融合，产生出杂种细胞 细胞融合的意义 1、克服植物远缘杂交不亲和性、 2、扩大遗传重组范