灯盏乙素和其衍生物灯盏乙素乙酯在大鼠体内药代动力学比较.docxVIP

灯盏乙素和其衍生物灯盏乙素乙酯在大鼠 体内药代动力学比较 ［摘要］该文建立了测定大鼠血浆中灯盏乙素及灯 盏乙素乙酯的反高效液相色谱方法，比较灯盏乙素及其衍生 物在大鼠体内的药代动力学特点。大鼠分别灌胃给予104 mg ? kg-1灯盏乙素和114. 5 mg ? kg-1灯盏乙素乙酯，颈静 脉采血，HPLC测定血浆中灯盏乙素及灯盏乙素乙酯的浓度， 经Winnonlin软件拟合房室模型，计算药代动力学参数。结 果表明，灯盏乙素和灯盏乙素乙酯口服后在体内均呈非房室 素的 素的 Tmax 为(6±1.26) h, Cmax 为(321. 55±48? 31) ug ? L-l, AUCO-t 为(2 974±753) h - ug ? L-1；灯盏乙 素乙酯的 Tmax 为 0.5 h, Cmax 为(1 550. 82±219. 75) h ? u g ? L-lo灯盏乙ug - L-l, AUCO-t 为 h ? u g ? L-lo灯盏乙 素乙酯比灯盏乙素入血速度快，且生物利用度是灯盏乙素的 2倍以上。 ［关键词］灯盏乙素乙酯；灯盏乙素；药代动力学 灯盏乙素是中药灯盏花中活血化瘀的主要药效成分 ［1］,目前主用于心脑血管类疾病的治疗，但灯盏乙素生物 利用度很低，在Beagle犬中的绝对生物利用度仅 (0. 4±0, 19) %,且体内消除迅速［2］。近年来针对如何提 高灯盏乙素体内生物利用度和延长体内作用时间等问题进 行了大量研究，主要集中在药物传递系统的改进［3］和灯盏 乙素的结构修饰［4］方面。有研究表明，灯盏乙素乙酯可透 过血脑屛障，对脑缺血神经具有很好的保护作用［5］,但关 于灯盏乙素乙酯的药代动力学及其与原药生物利用度的比 较未见报道，本文采用HPLC法测定大鼠血浆中灯盏乙素和 灯盏乙素乙酯的浓度，研究灯盏乙素乙酯在大鼠体内的药代 动力学性质，并与灯盏乙素进行比较，阐明其体内作用特点, 为制剂的研究和新药开发奠定基础。 1材料和方法 1仪器Shimadzu LC-20A高效液相色谱系统（日本岛 津公司），LC-20AT溶液传输单元，SPD-M20A二极管阵列检 测器，SPD-20A自动进样器，CT0-10AS柱温箱，LC solution 色谱工作站。TGL-16G高速台式离心机（上海安亭科学仪器 厂）；SK-1快速混匀器（金坛市华城恒磊实验仪器厂）；氮吹 仪及NA-5A氮气-空气一体机（北京中兴汇利科技发展有限 公司）。 1.2试剂 灯盏乙素乙酯（自制，批号110208,纯度＞98%, 简称DZY-02）；灯盏乙素（自制，批号110125,纯度＞98%, 简称DZ）；纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）；MCT （建德 市千岛精细化工实业有限公司）；阿拉伯胶（上海化学试剂 采购供应站试剂厂）；乙睛为色谱纯；其他试剂为分析纯。 1.3动物Wistar大鼠，SPF级，合格证号SCXK (京) 2007-004,中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心， 雄性，体重250?300 go 1.4 色谱条件 Kromasil 100-5, C18 色谱柱(4. 6mmX250 mm, 5 u m)o色谱保护柱C18, Dikma, No. 6201 o梯度洗脱 流动相：A相为乙睛，B相为0. 2%磷酸水。梯度洗脱程序：0? 15 min, 20%A； 16?35 min, 24%AO 流速 1 mL ? min-1 ；柱 温25 °C；进样量25 uLo 1. 5血浆样品的处理 取0. 5 mL血加入同等体积的1 mol ? L-1磷酸二氢钾轻摇混匀后，离心(5 000 r ? min-1, 5 min),取上层溶液600 u L,加3 mL丙酮，涡旋3 min, 高速离心(12 000 r - min-1, 7 min),取上清液氮气吹干。 残渣用50 uL甲醇复溶,高速离心(14 000 r ? min-1, 7 min) 后，直接取上清液进样，进样体积为25 uL, HPLC测定含 量。 1.6专属性考察 取大鼠空白血浆，按血浆样品处理项下 方法操作，分别进样测定空白血浆、空白血浆加对照品、大 鼠灌胃给药后的血浆样品。 1.7标准曲线和线性范围考察 精密称定DZ对照品适量, 甲醇溶解定容，得DZ对照品贮备液，并稀释成不同浓度。 精密量取一定体积的不同浓度DZ对照品溶液于6支5 mL离 心管中，氮气流吹干，分别加入600 uL空白血浆，得血药 浓度依次为 624, 312, 249.6, 156, 62.4, 15.6 ug ? L-1 的系列血浆样品，按血浆样品处理方法操作。 精密称定DZY-02对照品适量，乙醇溶解定容，得DZY-02 对照品贮备液，并稀释成不同浓度。精密量取一定体积的不 同浓度DZY-02对照品溶液