GB/T 9695.24-1990肉与肉制品　胆固醇含量测定.pdf

中华人民共和国国家标准 肉与肉制品 胆固醇含里测定 GB 9695.24一90 Meat and meat products-Method for determination of cholesterol 1主题内容与适用范围 本标准规定了肉与肉制品中胆固醇含量的测定方法。 本标准适用于肉与肉制品中胆固醉含量的测定。 2引用标准 GB 9695. 1肉与肉制品 游离脂肪含量的测定 3 原理 肉与肉制品中的脂类经皂化后，胆固醉作为不皂化物被提取出来，并与一定量的内标物混合后一起 注入气相色谱柱，求出胆固醇与内标物的峰面积比，根据工作曲线计算胆固醉的重量，以求得肉与肉制 品中胆固醇含量. 4试剂 所用水均为蒸馏水或相当纯度的水。 4.1无水乙醚。 4.2抓仿(GB 682), 4.3 1 mol/L氢氧化钾(GB 2306)/乙醇(GB 678)溶液。 4. 4无水硫酸钠。 4. 5胆固醉:1. 0 mg/ml,氯仿溶液。 4.6内标溶液: 4.6. 1 5-a胆幽烷/氯仿标准溶液:1. 0 mg/mL. 4.6.2菜油醇/氯仿标准溶液:3. 0 mg/mL. 4.6. 3胆固醇与5-胆街烷混合液:上述两种标准液等体积混合。 5仪器和设备 5，1实验室常规仪器。 5.2气相色谱仪，配有FID检测器。 6 试样 按照GB 9695. 1得到的脂肪。 分析步骤 7.1 不皂化物的提取 称取1. 00 g脂肪，置于10 mL容量瓶中用氯仿定容并摇匀。准确量取该试液1--5 mL,置于25 mL 国家技术监督局1990一11一15批准 1991一10一01实施 GB 9695.24一90 具塞试管中，准确加入0.5^1 mL内标物溶液((4.6.1)，然后将氯仿蒸干。加入1 mol/L氢氧化钾溶液 5 mL,装上冷凝管，在8595℃水浴上缓缓皂化1 h。取下冷却至室温，全部移入50 mL分液漏斗中，用 水10 mL洗具塞试管，洗液并入分液漏斗，加乙醚10 mL轻轻振摇，静置分层后，将水相放入原试管中， 加乙醚10 mL振摇，待分层后，将乙醚移入分液漏斗内。再用10 mL乙醚提取一次，此时分液漏斗中共有 30 mL溶液。用水2-3 mL洗涤乙醚液，分层后，弃去水相，用无水硫酸钠log干燥后，将乙醚层移入另 一具塞试管中，通氮气吹干后，加入乙醇1 mL, 了.2色谱条件 7.2.1色谱分离条件选择:对胆固醉峰要求其理论塔板数不少于1 600;胆固醇与菜油醇二者峰分辨率 不小于2.2;胆固醇的保留时间在8^-12 min之间;胆固醇峰强度为满量程的0.25-0.5. 7.2.2 2%ov-1/chromosorb W(60-80目)3 mm X 2 m , 7.2. 3柱温:260C。 7.2. 4进样口及检测器温度:300C o 7.2. 5载气(高纯氮)流速:60 mL/min, 7.3工作曲线制作 7.3.1不同配比的胆固醇与5-a胆菌烷混合标准液: 序 号 1 2 3 4 5 6 7 8 胆固醉,mg 0.55 0.88 1.10 0.55 0.88 1.10 1