第三章 细胞污染的检测与排除.pptVIP

第三章 细胞培养的污染和排除 细胞培养技术 细胞污染: 凡混入培养环境中对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物，都应视为污染。 污染 微生物的污染 不同细胞类型的交叉污染 细菌 霉菌 支原体 化学物质污染 病毒 污染途径： 　１．空气: 培养设施不宜置于通风场所； 定期清理净化工作台的过滤层，防止阻塞； 　操作中应减少空气流动；带口罩； 　夏季潮湿季节空气中含菌数量多，每立方米内含菌数不应超过1～5个。 ２．清洗消毒 培养器皿和容器洗刷不净残留污物、培养用液灭菌不彻底等，都可引入有害物。 ３．操作 实验操作马虎、动作不准确、消毒观念不强，使用的吸管、刀、剪沾染微生物等；或封瓶口时不严，都可发生污染。同时培养两种以上细胞，操作不慎，使用同一吸管或培养用液，可能导致细胞交叉污染。 ４．血清 血清也是污染细胞的来源，有的市售血清制备水平低、检测不严，常已被支原体和病毒污染。 ５．组织 初代培养组织常有污染；有的是在手术中污染，有的本身可能是被污染的组织(如已经发生溃烂的肿瘤组织)；手术用碘酒消毒后，擦拭不净可能混入碘污染 污染对细胞的影响 在细胞受有害物污染时间短、污染程度轻、并能及时排除污染物的情况下，细胞有可能恢复。 当污染物持续存在于培养环境中时，轻者细胞增殖生长缓慢、分裂相减少、细胞变得粗糙、细胞轮廓增强，重者细胞停止增殖，分裂相消失，细胞质中