免疫组化结果判断及常见问题的分析精编版.pptVIP

嗜酸性粒细胞中细胞色素显色 吞噬细胞内 含铁血黄素 坏死组织着色：AE1/AE3 坏死组织着色 交叉反应：乳腺ki-67组织细胞胞浆着色 黑色素瘤，细胞内含黑色素，呈紫黑色，HE染色 灶状着色：机械原因着色 Cyclin D1 套细胞淋巴瘤 全片着色 全片着色 边缘着色 “阴阳脸”着色 气泡 非特异性着色原因 对策 操作过程冲洗不充分 每步冲洗3×5min 内源性过氧化物酶 3％H2O2封闭 内源性生物素 使用生物素阻断试剂盒阻断 电荷吸附 非免疫动物血清封闭 抗体不纯 采用单克隆抗体 切片制片不当 改善取材和制片 加试剂后切片干燥 防止切片干燥 非特异性着色及其对策 无信号片 CD30 2. 染色的假阴性及其对策 染色假阴性原因 对策 组织处理不当（固定、浸蜡） 改善条件，重取材 一抗与二抗种属连接错误 确定抗体种属无误 抗体失效 不得使用过期的试剂盒 显色系统不相适配 更换适配的显色系统 操作不当，遗漏重要步骤 严格遵守操作规程 无色或浅色片 MCL理想的 CD5着色。所有的瘤细胞都着色很强。散在的T细胞着色比瘤细胞深。 MCL的CD5染色不足 (一抗浓度太低)。 MCL瘤细胞几乎都没有着色。 3. 染色过弱原因及其对策 染色过弱原因 对策 抗体浓度过低，孵育时间过短 提高浓度，延长时间 滴加试剂时缓冲液未沥干 滴加试剂前沥干多余水分 过度蛋白封闭 缩