蛋白激酶MARK激酶结构域的分子克隆及蛋白纯化专业论文.docVIP

青岛大学本科生毕业论文 PAGE 蛋白激酶MARK激酶结构域的 分子克隆及蛋白纯化 摘要：微管亲和性调节激酶（microtubule affinity regulating kinases, MARKs）是一类哺乳动物丝氨酸/苏氨酸激酶，属于Ca2+钙调蛋白依赖性蛋白激酶(Ca2+-calmodulin-dependent protein kinases, CaMK)家族腺苷单磷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate-activated protein kinases, AMPK）亚族。MARKs在细胞极性决定、胞内物质运输和细胞信号传导等多种细胞过程中发挥重要作用。MARKs能够磷酸化微管结合蛋白（microtubule-associated proteins, MAPs）的微管结合结构域，导致它们从微管上脱离，从而增加微管的运动性。人类MARKs由四个基因编码，产生四种异构体：MARK1，MARK2，MARK3，MARK4。该论文主要涉及人类MARK1-3激酶结构域的分子克隆及蛋白纯化。我们将编码MARK1-3激酶结构域野生型和无活性突变体的基因插入到pET28a-His-TEV原核表达载体上，通过Ni2+亲和层析和凝胶过滤层析进行目的蛋白的纯化。 关键词：MARKs MAPs PAR-1 MST1 MST2 分子克隆 蛋白纯化 Clo