免疫学检测原理及临床应用复习课程.pptVIP

免疫学检测原理及临床应用;相关帮助;内容提要：;概念：; ;应 用;（一）抗原-抗体结合反应的特点;抗原抗体结合的带现象与可见性;可逆性：;（二）抗原抗体反应的影响因素;1.电解质： 亲水性---------疏水性 失去电荷------发生凝集;2、酸碱度： 最适pH值：6—8 假阳性 假阴性;3.温度： 适当温度------增加碰撞机会 加快结合速度 37℃;4、抗原和抗体的性质 关键因素---特异性和亲和力 决定因素---二者的比例;（三） 抗原或抗???的检测方法 ; （一）凝集反应（agglutination）;1、直接凝集(direct agglutination) 2、间接凝集 （indirect agglutination） 3、间接凝集抑制试验 （in direct agglutination inhibition test） 4、协同凝集试验 （co-agglutination test）;（二）沉淀反应（precipitation）;1、单向免疫扩散（single immunodiffusion）;2、双向免疫扩散（doule immunodiffusion）：常用于抗原或抗体的定性检测、组成和两种抗原相关性分析。;3、免疫电泳（immunoelectrophoresis）;4、免疫比浊法（immunonephelomtry）：快速简便。用于血清IgG、IgA、IgM、 补体C3、C4含量测定; （三）补体参与的抗原抗体反应; 用标记物标记抗体或抗原进行抗原抗体反应借以提高免疫学诊断的敏感性;1、免疫荧光法（immunofluorescence,IF）;间接ELISA; ; BAS-ELISA法（ biotin-avidin-system，生物素-抗生物素系统-ELISA法）：敏感性更高。用于抗原抗体以及DNA、RNA的检测。;3、免疫组化 (immunohitochemistry);4、放射免疫测定法 （radioimmunassay,RIA）;5、化学发光免疫分析（chemiluminescence immunoassay）;6、免疫印记法（immunoblotting）;第2节 免疫细胞检测;;（1）尼龙棉柱分离法 B细胞滞留与柱上 T细胞流出 （2）E花环分离法 成熟人T细胞表面有CD2，绵羊红细胞的受体;（3）洗淘法（panning）（4）流式细胞仪（flowcytometry,FCM）;3、淋巴细胞亚群计数; ;1、细胞增殖试验具体方法;——检测CTL、NK、 LAK、TIL细胞杀伤靶细胞的功能 ①51Cr释放法 ②乳酸脱氢酶释放法 ③ 细胞凋亡检查法：TUNEL法（TdT dependent dUTP-biotin nick end labeling）、FACS测定法 ;（3）分泌功能测定;迟发型超敏反应：旧结核菌素试验（ OT试验 ） 皮试（+）——有一定的细胞免疫能力 皮试（—）——细胞免疫功能缺损;;（二）补体测定;（三）细胞因子检测;（三）细胞因子检测;2.生物活性测定??;（四）CD分子、表面受体和粘附分子的测定;第23章 免疫学防治;; 人工主动免疫常用制剂——疫苗、类毒素 死疫苗（灭活疫苗）是选用免疫原性强的病原体，经理化方法使其失去活力制备而成的疫苗。伤寒菌、百日咳杆菌、霍乱弧菌、钩端螺旋体、流感病毒、狂犬病病毒、乙脑病毒疫苗均为灭活疫苗。 减毒活疫苗：是用减毒或无毒力的活病原体制成的疫苗。脊髓灰质病毒、卡介苗、麻疹病毒疫苗是常用的减毒活疫苗。 类 毒 素：细菌外毒素经甲醛处理后，失去毒性而保留其免疫原性即为类毒素。常用的类毒素有破伤风类毒素、白喉类毒素等。;死疫苗和活疫苗的比较;（二）新型疫苗; 人工被动免疫 是给人体注射含特异性抗体的免疫血清或细胞因子等制剂，以治疗或紧急预防感染疾病。人工被动免疫力维持的时间短，约2~3周。常用制剂有： 抗毒素 人免疫球蛋白制剂 细胞因子制剂 单抗/基因工程抗体;免 疫 治 疗(immunotherapy);（一）特异性免疫治疗;2、被动免疫治疗;人工自动免疫与人工被动免疫的比较;（二）非特异性