222　动物细胞融合与单体克隆抗体高中生物人教版选修3　现代生物科技专题7848ppt.pptxVIP

动物细胞融合与单克隆抗体;一、动物细胞融合;1、定义： 也称细胞杂交。指用自然或人工方法使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程，融合后形成的单核细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。;2、诱导融合的因素 化学法：聚乙二醇PEG诱导融合. 物理法：电激融合 生物法：灭活的病毒诱导融合.(利用灭活仙台病毒是动物细胞融合所特有的。 这是由于病毒的磷脂外衣与动物细胞的膜十分相似的缘故。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。) ; 思考讨论： 为什么细胞融??过程中使用的病毒需要灭活？ ;植物、动物细胞融合的比较;什么是抗体？ 　　抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 B淋巴细胞产生抗体。;人们获得抗体的传统方法？ 向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗 体，然后从动物血清中分离所需抗体。;（一）单克隆抗体的制备——一个大胆的猜想;;;;;细胞合成DNA有D和S两条途径，人淋巴细胞中有这两种DNA合成途径，鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，然后在培养液中加入氨基喋呤。;;5. 第二次筛选：在“多孔培养板上”培养杂交瘤细胞系列 ，每孔只放一个杂交瘤细胞。“克隆化培养”每个杂交瘤细胞，并进行“单一抗体检测”，“检测阳性”的孔内即是所需要的杂交瘤细胞。;动物特异性免疫 分离B淋巴细胞（B）；找到骨髓瘤细胞（G）。注意B淋巴细胞是一个系列。（B1,B2,B3,---Bn） 细胞融合——融合方式:（BB;BG;GG） 第一次筛选：在“选择培养基培养”上培养筛选杂交瘤细胞（只有BG杂交瘤细胞存活。但BG杂交瘤细胞也是一个系列：如B1G,B2G---BnG。而BB,GG在此培养基上不能存活。） 第二次筛选：在培养出的杂交瘤细胞系列中进行“单一抗体检测”，“检测阳性”的孔内即所需要的能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 选择所需要的杂交瘤克隆细胞群，体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 提取单克隆抗体。;杂交 细胞;3）、为何要进行两次筛选？;1、作为诊断试剂： 2、用于治疗疾病和运载药物： ;1、作为诊断试剂： 在临床生化诊断、病理组织定位、体内肿瘤的定位等,与常规抗体相比,具有准确、高效、简易、快速特点. ;抗人绒毛膜促性腺激素 单克隆抗体;1、作为诊断试剂：在临床生化诊断、病理组织定位、体内肿瘤的定位等,与常规抗体相比,具有准确、高效、简易、快速特点. 2、用于治疗疾病和运载药物： 主要用于癌症治疗。 生物导弹：抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素+化学药物或细胞毒素。（单克隆抗体：导向。准确找到癌细胞位置，原位杀死癌细胞。） ;“生物导弹” 用癌细胞作为抗原，免疫小鼠，制备抗癌细胞单克隆抗体，并与抗癌药物连接，便制成了生物导弹，注入患者体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在的位置，杀死癌细胞。这样，既不损伤正常细胞，又减少了药剂用量。;1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（　　） A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同 2. 以下不能说明细胞全能性的实验是（ ） A.胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 B.紫色糯性玉米种子培育出植株 C.转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 D.番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株 ;3. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） ①淋巴细胞　 ②小鼠骨髓瘤细胞　 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ B．①③⑤　　 C． ①②③④ 　 D．②③ ;4．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ） A．培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养中的人B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 5.在用动物细胞融合技术制备单克隆抗体时， 将抗原注射到小鼠体内，可获得(多选) （ ） A．T淋巴细胞 B．效应B淋巴细胞 C．抗体 D．记忆细胞 ; ;1、人们获得抗体的传统方法？ 向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗 体，然后从动物血清中分离所需抗体。;;思考：; 　　由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。