RNA促进小鼠重组染色质白蛋白基因DNaseⅠ消化敏感性.pdf

遗 　传 H ER EDI TA S ( B eij ing) 25 ( 1) :30～36 ,2003 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　研究报告 RNA 促进小鼠重组染色质白蛋白 基因D Nase Ⅰ消化敏感性 吕占军 ,王秀芳 ,翟 　羽 ,宋淑霞 (河北医科大学实验动物学部 ,石家庄 0500 17) 摘 　要 :同样的基因在不同的分化细胞中表达不同 ,基因的选择性表达问题涉及分化和衰老的本质 。转录基因对 ( ) DNase ⅠDNA 酶 Ⅰ消化敏感 ,本文研究了 RNA 对小鼠重组染色质白蛋白基因DNase Ⅰ消化敏感性的影响 。分离 BALB/ c 小鼠脑细胞核 ,加入终浓度为 2mol/ L 的NaCl 破坏核小体结构 ,加入不同量 、不同来源的 RNA ,装透析袋 , 逐渐降低离子强度进行染色质重组 。重组染色质中加入 DNase Ⅰ消化 DNA ,PCR 扩增白蛋白基因的外显子 1 到外 显子 2 约 1200bp 区段 ,PA GE 电泳后 ,用银染色观察不同来源 RNA 促进 DNase Ⅰ对白蛋白基因的消化作用 。不同 ( ) 组织来源 肝 、肺 、肾、脑 RNA 对小鼠重组染色质中白蛋 白基因 DNase Ⅰ消化敏感性均有促进作用 ,其中肝和肺 RNA 促进消化作用较强 ;酵母 t RNA 无显著促进消化作用 ;消化促进作用与 RNA 剂量有关 。RNA 能增加 DNase ( ) Ⅰ对白蛋白基因的消化敏感性且有组织 细胞 来源特异性 。又委托丹麦 Chemical R D 实验室合成 2 条与白蛋白 μ 基因互补的各 23 核苷酸的 RNA ,用其进行重组试验 。结果表明 ,重组混合物中含有低至 0 . 2 g/ mL 的 RNA ,即可 以发挥显著的DNase I 消化促进作用 。 关键词 :基因敏感性 ;RNA ;染色质重组 ;PCR ;衰老 中图分类号 :Q522 　　　文献标识码 :A 　　　 文章编号 :0253 - 9772 (2003) 0 1 - 0030 - 07 RNA Responsible f or Conferring a D Nase I Sensitive Structure on Albumin Gene in Assembled Chromatin L ZhanJ un ,WAN G XiuFang ,ZHA I Yu ,SON G ShuXia ( Dep art ment of L aboratory A ni m al , Hebei M edical University , S hij iaz h uang 0500 17 , Chi na) Abstract :Alt hough t he set of genes is virtually t he same in