快速测定生物样品中蛋白含量的同步荧光法研究.docVIP

快速测定生物样品中蛋白含量的同步荧光法研究 崔凤灵X,闫迎华,张强斋,渠桂荣,卢雁 (河南师范大学化学与环境科学学院,河南省环境污染控制重点实验室,新乡453007 摘要:最佳实验条件下,基于脱氧尿苷与人血清白蛋白(HS A相互作用,导致血清白蛋白的同步荧光光谱发生特异性变化,且体系的同步荧光强度和溶液中白蛋白的浓度呈良好的线性关系,建立了以脱氧尿苷为探针,运用固定波长同步荧光光谱快速测定生物样品中蛋白质总含量的新方法。深入考察了$K值、反应介质、试剂用量、离子强度、加入顺序、反应时间等因素对测定的影响。在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度与血清白蛋白在2176~52414L g P mL范围内的线性相关系数为019991,方法的检出限可达0111L g P mL。运用本方法对人血清、唾液和尿液等生物样品进行测定并进行加标回收实验,回收率在9810%~10215%之间。对11份空白溶液进行平行测定,相对标准差为112%。 用经典的考马斯亮蓝G2250(CBB法做了对照实验,两种方法测定结果基本一致。还考察了一些常见离子和有机物存在时对蛋白质测定的影响。本方法已用于血清、唾液和尿样等生物样品中蛋白质总量的快速测定。 关键词:脱氧尿苷;人血清白蛋白(HSA;考马斯亮蓝G2250(CBB;同步荧光光谱;分子探针 中图分类号:O657.3文献标识码:A文章编号:100020720(2009