养殖鱼类生殖内分泌调控相关功能基因的研究和应用.pdf

第17卷第2期 中国水产科学 Vol.17 No.2 2 0 1 0 年 3 月 Journal of Fishery Sciences of China March 2010 ·特约综述 · 养殖鱼类生殖内分泌调控相关功能基因的研究和应用 张勇，李水生，刘云，刘晓春，林浩然 （中山大学 有害生物控制与资源利用国家重点实验室；水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物繁殖重点实验室，广东 广 州 510275） - 摘要：新型的神经内分泌因子 kisspeptin 与 GnIH （gonadotropin inhibitory hormone） 对哺乳动物的生殖轴起着直接而相反的 调控作用，kisspeptin 刺激脑垂体促性腺激素（GtH，gonadotropin） 的合成与释放，而 GnIH 抑制 GtH 的合成与释放。然而，在 鱼类中，相关研究甚少。本研究室利用比较基因组学技术，通过同线性分析结合分子生物学手段，在斑马鱼（ ）、 Danio rerio 金鱼（ ）中克隆得到了 kisspeptin（ 、 ）与 GnIH 以及它们相关受体的基因 cDNA 序列。氨基酸序列 Carassius auratus kiss1 kiss2 同源比对结果显示：在脊椎动物中，kisspeptin 的核心肽相对保守，而 GnIH 的核心肽在不同物种中则有较大的差异。比较 基因组分析显示 kisspeptin 与 GnIH 基因在鱼类、两栖类、鸟类和哺乳类都维持着保守的同线性结构；并且，同线性的结果 表明，鱼类 kiss1 与 kiss2 基因来源于早期的基因组复制，在漫长的进化过程中，哺乳类丢失了 kiss2 基因。通过配体受体结 合实验，证明 2 种 kisspeptins 均能激活其相关受体 GPR54（GPR54a、GPR54b），启动下游通路，但却存在一定的配体 - 受体 选择性差异。金鱼、斑马鱼组织表达模式研究显示：kisspeptins 与 GnIH 以及它们相关受体在生殖相关组织或区域（下丘脑、 垂体、性腺）均有丰富的表达，提示 kisspeptins 与 GnIH 可能参与鱼类的生殖调控。通过化学合成金鱼 kisspeptins 与 GnIH 的核心肽，在体注射成熟的雌性金鱼，发现 kiss1 能显著刺激金鱼 LH 的分泌，并且能诱导金鱼排卵，而 kiss2 不能；在高剂 量的状况下，GnIH 亦能有效抑制金鱼 LH 的分泌。然而，在离体实验中，2 种 kisspeptin 与 GnIH 对金鱼垂体细胞 LH 的分 泌均没有显著的影响，提示 kisspeptins 与 GnIH 对金鱼的 LH 调控可能发生于下丘脑水平。以上结果表明：与哺乳动物相 类似，在鱼类生殖轴中也存在 kisspeptins 与 GnIH 的正负调控系统。本文侧重对这项研究以及相关的研究成果进行归纳 与分析，旨为深入探讨鱼类生殖内分泌调控相关功能基因提供参考。[ 中国水产科学，2010，17（2）：363-368] 关键词：kisspeptin；GnIH；GtH；生殖调控 中图分类号：S9　　　　　　　文献标识码：A　　　　　　 文章编号：1005-8737- （2010）02-0363-07 鱼类是人类所需动物蛋白的重要来源。中国是 制成功国内外首创的新型鱼类催产剂，取得显著的 世界第一的渔业大国和水产养殖大国，其中，水产养 推广应用成效，解决了养殖鱼类人工繁殖和苗种来 殖产量占世界总产量 70% 左右。在水产养殖品种中， 源的问题。进入 21 世纪后，开发利用水产养殖动物 鱼类是继藻类、贝类和虾类之后的第四