利用流式细胞仪分选土壤中发生自然转化的阳性.pdf

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第 卷 第 期 华 中 农 业 大 学 学 报 35 2 Vol.35 No.2 年 月 , 2016 3 JournalofHuazhon A riculturalUniversit Mar.201656~62 g g y 利用流式细胞仪分选土壤中发生自然转化 的阳性转化子 王玉萍 黄巧云 陈雯莉 , 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 武汉 430070 , 摘要 为确定土壤中的 通过自然转化的方式发生水平基因转移的频率 将 个带有 和卡那霉素 DNA 1 e gfp r , , 抗性基因Kan的质粒 DNA添加到自然土壤中 分离菌悬液 上流式细胞仪分选能发出绿色荧光且具有卡那霉 -7 , 。 , 素抗性的阳性转化子 确定土壤中发生 自然转化的频率小于 10 分离的菌悬液通过培养基的富集 从 , , 个细胞中分选获得了 个细胞 最终得到了纯化的阳性转化子 证实土壤中的 通过自然转化 82 DNA 发生了水平基因转移。 ; ; ; ; 关键词 水平基因转移 自然转化 阳性转化子 流式细胞术 分选 中图分类号 文献标识码 文章编号 ( ) S151.9 A 1000-2421201602-0056-07 自然界中水平基因转移( 微镜就能够直接观察并比较准确地计量环境中的转 horizontalenetrans g - [] , ) , 、 。 3 。 ferHGT 有多种途径 包括转化 转导和接合 转 化子 化一般是指某一种基因型的细胞从周围介质中吸收 但截至目前还没有明确的实验数据确定 DNA , 另一基因型细胞游离 DNA 从而使受体的基因型和 在土壤中通过自然转化方式发生水平基因转移的

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