培养基质量保证灭菌方式.ppt

培养基分装，10mL/支； 新鲜菌液10倍稀释后，选取10CFU~100CFU稀释度工作菌悬液； 取1mL工作菌悬液接入待测培养基； 同时取1mL倾注平板，做接种量计数用； 按标准方法中的培养时间和温度进行培养（如增菌时间为8h以下，取10μL增菌液倾注平板，再按适合的时间和温度培养，结果按附录F判定）； 结果解释： 0 表示无混浊； 1 表示很轻微的混浊； 2 表示严重的混浊 目标菌的浊度值应为2. 4、培养基性能测试方法 4.2 半定量方法 ——非选择性液体增菌培养基 4、培养基性能测试方法 4.2 半定量方法 ——非选择性液体增菌培养基 混合菌接种： 同时分别将目标菌菌悬液（与待测培养基接种同一稀释度）和非目标菌菌悬液（比待测培养基接种小10~100倍稀释度）1mL倾注平板，用作接种量计数 非目标菌接种：在待测培养基中接种等量混合菌试管中的非目标菌。 培养液接种： 混合菌培养液接种：用10μL接种环取1环培养后的混合菌培养液，划线接种到特定的选择性平板上； 非目标菌培养液接种：吸取10μL培养后的非目标菌培养液，涂布到非选择性平板上； 计算和结果解释 目标菌在选择性平板上的菌落应?10CFU 非目标菌在非选择性平板上的菌落数应?100CFU 目标菌10CFU~100CFU 非目标菌1000CFU~5000CFU 接菌量1mL 则表示待测液体培养基的生长率良好 4.2 半定量方法 ——选择性液体增菌培养基 4、培养基性能测试方法 例：亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC） 目标菌株：鼠伤寒沙门氏菌(10CFU~100CFU)； 非目标菌：大肠埃希氏菌(1000CFU~5000CFU) 铜绿假单胞菌(1000CFU~5000CFU); 混合接种：混合菌1mL接种待测培养基；分别将鼠伤寒沙门氏菌（10CFU~100CFU）和大肠埃希氏菌，铜绿假单胞菌（小10~100倍稀释度）1mL倾注平板，用于计数； 非目标菌接种：在待测培养基中接种等量混合菌试管中的非目标菌。 4、培养基性能测试方法 4.2 半定量方法 ——选择性液体增菌培养基 4.2 半定量方法 ——选择性液体增菌培养基 4、培养基性能测试方法 例：亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC） 混合菌培养液的接种：用10μL接种环取1环培养后的混合菌培养液，划线接种到特定的选择性平板上； 非目标菌培养液接种：吸取10μL培养后的非目标菌培养液，涂布到非选择性平板上； 计算和结果解释 鼠伤寒沙门氏菌的菌落应?10CFU 大肠埃希氏菌和铜绿假单胞菌在非选择性平板上的菌落数应?100CFU 目标菌接种：取1mL目标菌（10CFU~100CFU稀释度）接种待测培养基，同时取1mL倾注平板，用作接种量计数； 非目标菌接种：取1mL非目标菌（1000CFU~5000CFU稀释度）接种待测培养基，同时取1mL（比待测培养基接种小10~100倍稀释度）倾注平板，用作接种量计数； 结果解释： 0 表示无混浊； 1 表示很轻微的混浊； 2 表示严重的混浊。 如需观察产气，记录小导管收集气体的体积比。 目标菌的浊度值应为2，产气应为1/3或以上； 非目标菌的浊度值应为0或1，无产气现象。 4、培养基性能测试方法 4.2 半定量方法 ——选择性液体计数培养基 4、培养基性能测试方法 4.2 半定量方法 ——选择性液体计数培养基 用1μL接种环取测试菌培养物在测试培养基表面划平行直线（细菌），或用接种针直接挑取斜面培养物点种接种（霉菌），按标准规定的培养条件培养。 结果解释 0 表示无生长； 1 表示微弱生长； 2 表示生长良好。 目标菌：得分为2，有典型的菌落外观、大小和形态； 非目标菌（选择性）：得分为0或1； 非目标菌（特异性）：有典型的菌落外观、大小和形态。 4.3 定性方法 ——非选择性、选择性固体计数和分离培养基 4、培养基性能测试方法 用1μL接种环取工作菌悬液，接种到待测液体培养基中，培养。 结果解释： 0 表示无混浊； 1 表示很轻微混浊； 2 表示严重混浊。 目标菌：浊度值为2； 非目标菌：浊度值为0或1； 注：有时可以观察到微生物生长后聚集成细胞团，沉积在试管或瓶子底部， 发生这种情况时，小心振荡试管后再进行观察。 4、培养基性能测试方法 4.3 定性方法 ——非选择性、选择性液体增菌和计数培养基 用1μL接种环取一环工作菌悬液直接接种到待测培养基中，混匀，立即用1