微生物生长及其控制00001.pptxVIP

第1页/共35页第2页/共35页第3页/共35页同步生长物获得---- 1.环境条件诱导法 如变换温度、光线、添加新鲜培养基、加抗生素等。 如将生长不同步的细胞转接到含一定浓度、能抑制蛋白质等生物大分子合成的化学物质，如氯霉素等培养基中，培养一段时间后再转接到完全培养基中 获得同步生长细胞。 另将不同步的芽孢杆菌培养至绝大部分形成芽孢，然后加热处理杀死营养体 新鲜培养基中 经培养得到同步细胞。 又如光合细菌可将不同步细菌经光照培养后再转到黑暗中培养 这样通过光照和黑暗交替培养方式可得到同步生长物。第4页/共35页同步生长物获得 --- 2.机械筛选法 根据微生物细胞在不同生长阶段的细胞体积与质量不同或根据它们和某种材料结合能力不同的原理设计出来的方法。 (1)过滤法：将不同步的细胞培养物通过孔径大小不同微孔滤器，从而将大小不同细胞分开，分别将滤液中细胞取出 培养 获同步生长细胞。 (2)密度梯度离心法： 将不同步细胞培养物悬浮在不被这种细菌利用的糖或葡聚糖的不同梯度溶液中，通过密度梯度离心将不同细胞分布成不同细胞带，每一细胞带的细胞大致处于同一生长期细胞 分别取出 获同步生长细胞。 (3)硝酸纤维素滤膜法：根据硝酸纤维素滤膜可吸附与该滤膜相反电荷细胞的原理，让非同步细胞悬液通过垫有此膜的过滤器 一大群细胞被吸附住 滤膜翻转并重新置于滤器中，让新鲜培养液流过滤器 洗去未结合细菌 滤器培养一定时间 (吸附细胞开始分裂)再用新鲜培养液洗过滤器 其中分裂后一个子细胞仍吸附在膜上，另一个被培养液洗脱 分步收集滴下的细胞液，经培养同步细胞液(图) 第5页/共35页第6页/共35页第7页/共35页第8页/共35页第9页/共35页微 生 物 的 连 续 培 养定义：是指在深入研究单批培养中生长曲线形成的内在机制基础上，开放培养系统，不断补充营养液、解除抑制因子、优化生长代谢环境的培养方式。具体：微生物以单批培养方式培养到指数期的后期，一面以一定速度连续流进新鲜培养基并通入新鲜空气(搅拌均匀)，另一面利用溢流方式以同样流速不断流出培养物，使培养物达动态平衡，使微生物长期保持在指数期的平衡生长状态和稳定的生长速率上，于是形成连续生长 ( continuous growth )(见图)第10页/共35页常 用 的 连 续 培 养 方 法 1.恒浊法： 以培养器中微生物细胞的密度为监控对象，用光电控制系统来控制流入培养器的新鲜培养液的流速，同时使培养器中的含有细胞与代谢产物的培养液也以基本恒定的流速流出，从而使培养器中的微生物在保持细胞密度基本恒定条件下进行培养的一种连续培养方式。 用于恒浊培养的装置，称恒浊器。 用本法连续培养微生物，可控制微生物在最高生长速率与最高细胞密度的水平上生长繁殖，达到高效率培养目的。 本法主要用于微生物菌体及与菌体生长相平行的代谢产物的生产的发酵工业。 2.恒化法： 是通过控制培养基中营养物(主要是生长限制因子的浓度，如氨基酸、氨和铵盐等N源或是葡萄糖、麦芽糖等C源或无机盐、生长因子等)来调控微生物生长繁殖与代谢速度的连续培养方式。 用于恒化培养的装置，称恒化器。 本法往往控制微生物在低于最高生长速率条件下生长繁殖。恒化连续培养被广泛用于研究微生物利用某种底物进行代谢的规律(以实验室为主) 。第11页/共35页第12页/共35页连续培养优、缺点 优点： 1.高效(简化装料、灭菌、出料放罐、清洗发酵罐等，提高设备利用率等)。 2.自控。3.产品质量稳定。 4.节约能源。5.节约时间等。 缺点： 1.菌种易退化[连续培养中微生物处于高速细胞分裂、突变机会增多(往往呈”负变”)]。 2.易污染杂菌(连续运转中，管道等难免渗漏，通气过滤失灵等)。 3.营养物利用率比单批营养要低，否则菌体出现衰亡期，这样对代谢产物积累不利。 4.连续培养是有限的，最多几个月至1—2年。 应用： 酵母菌SCP生产、丙酮丁醇发酵、污水处理、用解脂假丝酵母进行石油脱蜡等。第13页/共35页第14页/共35页第15页/共35页第16页/共35页第17页/共35页氧气对厌氧菌的毒害机理 体内酶促或非酶促方式 厌氧菌无SOD O2 + e-O2.-无法使O2.-变成 H2O2[有O2下 体内的O2-毒害自身(厌氧菌)] 耐氧菌大多有SOD 好氧菌具SOD +2H+ 好氧菌具H2O2酶 耐氧菌具过氧化物酶H2O H2O22 H2O 毒伤作用减轻 NADH2 NAD第18页/共35页第19页/共35页第20页/共35页第21页/共35页第22页/共